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2011 年 5 月 热 带 农 业 科 学 第 31 卷第 5 期 May． 2011 Vol．31, No．5 CHINESE JOURNAL OF TROPICAL AGRICULTURE 2 种微藻总 RNA 提取方法的比较① 李亚军1)② 费小雯1,2) 邓晓东1)③ (1 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 海南海口 571101 2 海南医学院理学院生化教研室 海南海口 571101 ) 摘 要 以微茫藻和莱茵衣藻为材料 ， 比较 Trizol 试剂法和 SDS-LiCl 沉淀法提取 2 种微藻总 RNA 的效果， 以 期筛选出适合微藻 RNA 的提取方法。 结果表明， SDS-LiCl 沉淀法能从微茫藻中提取高质量的 RNA， 而 Trizol 法 和 SDS-LiCl 沉淀法均能从莱茵衣藻中获得高质量的 RNA， 但 Trizol 法更为简单有效。 RT-PCR 结果表明 ， SDS-LiCl 沉淀法提取的微茫藻总 RNA 和 Trizol 法提取的莱茵衣藻总 RNA 都能直接用于分子克隆和基因表达分 析等分子生物学实验 。 关键词 RNA 提取 ； 微茫藻 ； 莱茵衣藻 ； Trizol 试剂法 ； SDS-LiCl 沉淀法 ； 分类号 Q946.2 ； Q949.2 Two Protocols for Total RNA Extraction from Microalgae ) 1 LI Yajun ) 1,2 FEI Xiaowen ) 1 DENG Xiaodong （1 Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology, CATAS, Haikou, Hainan 571101 2 Department of Biochemistry, Hainan Medical College, Haikou 571101, China） Abstract To select the optimum extraction method for total RNA from microalgae, Trizol method and SDS-LiCl method were used with Chlamydomonas reinhardtii and Micractinium pusillum as materials. The results showed that, high-quality RNA from M. pusillum was obtained by using SDS-LiCl method. In contrast, both Trizol method and SDS-LiCl method were suitable for total RNA extraction from C. reinhardtii. However, the former is more simple and efficient than the latter. The RT-PCR results showed that total RNA isolated from M. pusillum by using SDS-LiCl method and from C. reinhardtii by using Trizol method could be directly used for molecular biology experiments， such as molecular cloning and gene expression analysis. Keywords Chlamydomonas reinhardtii ; Micractinium pusillum ; RNA extraction; SDS-LiCl method ; Trizol method 微藻是一类在显微镜下才能辨别其形态的单细 素、 藻蓝蛋白和活性多糖等， 可以用来生产保健食 胞或简单多细胞生物， 在陆地和海洋分布广泛， 迄 品和药物[7] 。 鉴于微藻拥有的巨大开发价值和经济 今已发现 3 万余种。 在医药、 食品、 生物能源、 农 潜力， 微藻生物技术领域也得到了迅速发展。 微藻 业及环境保护等诸多领域， 微藻具有重要的开发利 总 RNA 的提取是进行分子生物学研究的必要前提 ， 用价值。 利用微藻不仅可生产生物柴油和氢气等再 基因的克隆和表达等研究都需要高质量的 RNA。 但 生能源[1-3]， 还可减排 CO2 和净化污水[4-5]。 微藻直 是微藻种类繁多， 且大多具有坚硬的细胞壁， 有的 接作为饵料已成功应用于水产养殖业中[6]， 同时 微藻还含有大量的多糖和