第19章---生物素-亲合素系统及其在免疫检测技术中的应用.pptVIP

C NH NH CH CH2 CH CH O S (CH2)4COOH NH2 C O CH2 CH2 C O NH OH C O O N C O O C CH2 CH2 EDC 生物素 N-羟基 丁二酰胺 碳二亚胺 生物素N- 羟基丁二 酰亚胺酯 （BNHS） Ⅰ Ⅱ 1. 标记蛋白质氨基的活化生物素 BNHS分子可与蛋白质赖氨酸的氨基形成肽键。 BNHS适用标记抗体和中性或偏碱性的蛋白质。 生物素小分子与大分子抗体或酶结合后会产生 空间位阻效应，对生物素与亲合素的结合以及 BAS的应用效果造成干扰。 如何减小空间位阻 长臂活化生物素（BCNHS）： 在生物素和N-羟基丁二酰亚胺之间添加两个6-氨基已糖分子基团，形成连结臂，增加B与大分子间的距离，减少位阻效应，更好发挥生物素的活性作用。 标记蛋白质氨基与醛基的活化生物素 醛基 氨基 长臂 2个6-氨基已糖分子 2. 标记蛋白质醛基的活化生物素 生物素酰肼(BHZ)：水合肼与生物素的合成物用于标记偏酸性糖蛋白 。 肼化生物胞素(BCHZ) ：生物素与赖氨酸氨基连接后与无水肼反应而成BCHZ还可标记氨基。 3. 标记蛋白质巯基的活化生物素 马来酰亚胺-丙酰-生物胞素（MPB) ：能特异地与蛋白质巯基结合的活化生物素。 4. 标记核酸的活化生物素 (1)光敏生物素(photobiotin)： 侧链上连接的芳香基叠氮物基团，经光照