医学常见的CTC在肿瘤诊疗中的应用韩世强.pptVIP

循环肿瘤细胞(CTC)在液体活检中的特殊意义 韩世强 Cancer Res. 2003;63: 3805-11. Breast Cancer Res. 2009;11:R46. Am J Pathol. 2011;178:989-96. 循环肿瘤细胞（CTC） 1869年 Aust Med J，Ashworth最早 在转移性癌症患者血液中观察到； 存在于外周循环的各类肿瘤细胞统称； 来自原发灶、转移灶或不明部位。 大多数CTC在外周血循环中会发生凋亡，只有少数CTC才能够形成转移 CTC形成、播散及转移的模式图 “液态活检”的标记物 CTC ctDNA(cfDNA) 主要指来自于抗凝的外周血全血， 完整的肿瘤细胞 主要指来自于抗凝血外周血的血浆，片段化的DNA片段 一般认为来源于肿瘤原发灶/转移灶 肿瘤瘤细胞凋亡/坏死释放的DNA片段 活细胞，一般不宜长期保存 提取纯化后的核酸，可以保存 可以用于细胞学形态、结构分析；也可以分析细胞DNA、RNA、蛋白质等各类标志物 一般用于DNA突变监测、甲基化等DNA修饰相关分析 用于病情评价、预后判断，肿瘤早期诊断潜力不明确 用于个体化治疗，肿瘤早期诊断潜力相对明确 还有miRNAs，Peptides， Exosomes（外泌体），Secretomes（分泌物质组）等。 组织活检的局限性 很多肿瘤患者无法进行手术 穿刺受检者严重的不合适 穿刺自身的临床风险 某些肿瘤解剖位置不便进行穿刺 肿瘤的异质性 阿拉伯医生Albucasis （936-1013）及其发明的外科手术器械 Folia Histochem Cytobiol. 2009年47卷2期191-7页 　但我的一些病友只是定期做CT检查，并不抽血，是怎么回事呢？ 　如果您朋友的肿瘤对常见标志物都不敏感，那我就没办法抽血查肿瘤了，只能等肿瘤长到直径0.5 cm以上再借助CT或MRI检查发现。但等肿瘤长大到肉眼能看到时，治疗效果就很差了。 CTC“液体活检” Breast Cancer：N Engl J Med 351:781-791,2004 Prostate Cancer : Lancet Oncol 10:233-239, 2009 Colorectal Cancer: J Clin Oncol 26:3213-3221, 2008 获取CTC需要解决的技术问题 从红细胞和白细胞中富集恶性肿瘤细胞 将恶性肿瘤细胞与红细胞、白细胞、正常上皮细胞、造血干细胞等区分开来 每10mL血液中可能仅含有几个到几十个循环肿瘤细胞，而10mL血液中含有的白细胞约有1亿个，红细胞有500亿个。 三种技术 过滤法 ISET: Isolation by Size of Epithelial Tumor cells 8μm孔径过滤膜，漏检体积较小的肿瘤细胞 敏感性低 梯度密度法 肿瘤细胞和单核细胞密度小于1.077g/ml CTC纯度低，混入较多白细胞 肿瘤细胞会迁移至血浆层，而聚集后容易下沉 聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)对细胞有毒性 免疫磁珠法 肿瘤细胞表面抗原 CTC纯度低，混入较多白细胞 不能有效排除细胞碎片 假阳性和假阴性高 Cell Search---免疫磁珠+流式细胞分析+化学发光 CTC检测的临床应用 CTC临床应用一：评估预后 11 治疗前 一个周期后 N Engl J Med 2004;351:781-91. 对于原发性肺癌患者，CTC计数在有远处转移的肺癌患者中有显著升高，相关性优于CEA。 CTC临床应用二：评估复发转移 Clin Cancer Res 2009;15(22) 45-male-ESCC（食管鳞状细胞癌） 12w，CT-骨和皮下转移 104w，PET-CT显示复发 CTC可动态监测肿瘤复发转移风险，及早发出肿瘤转移复发预警，结合血清标志物，能更准确预测疾病进展。 World J Gastroenterol.2015,21(25):7921-8. CTC临床应用二：动态监测复发转移 CTC检测的临床应用 循环肿瘤微栓子(CTM) Hui L et al., PLos one, 2013. 循环肿瘤微栓子又称循环肿瘤细胞团，一般由3个及以上肿瘤细胞组成。 CTM成瘤能力强于单个CTC Cell. 2014, 158: 1110–1122. CTM的成瘤、转移能力是单个CTC的23-50倍 CTM与预后评估 J Clin Oncol. 2012;30: 525-32. CTC升高对于判断远处转移的敏感性达71%，特异性达83% CTC计数和血清CEA水平在不同切点的诊断价值 CTC检测的临床应用 3.3% 2.7% Yu M et al., Scie