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- 2018-11-16 发布于天津
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细胞培养专用《一步法恒温支原体检测试剂盒》溶液型
细胞培养专用 《一步法恒温支原体检测试剂盒》 (溶液型)
使用说明书 (版本180820)
货号
MD001
储存条件
该产品随冰袋运输,收到产品后请立即放-20 ℃冰箱保存,该条件下,至少2 年内仍然有活性。
产品用途
《一步恒温法支原体检测试剂盒》主要用于检测细胞培养液或别的液体样品 (如血清等)中是否含有支原
体。本产品仅用于基础研究。
产品简介
哺乳动物细胞的培养,支原体 (Mycoplasma )污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所
有参数,导致实验结果的不准确、甚至完全错误 (支原体污染对细胞的详细危害,请参考本公司的网站:
)。从2013 年开始,《Nature》期刊已正式要求投稿的文章,如涉及细胞培养都要进行支原
体检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。
培养法是相对可靠的支原体检测技术,但是该方法非常耗时的,需要数周,不适合作为细胞培养液中支原
体污染的快速检测。此外,通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最常见的支原体,即猪鼻支原体
(M.Hyorhinis )。这是因为猪鼻支原体无法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。而猪鼻支原体约占所有支
原体污染的20-50%。
有的实验室使用荧光染色法检测支原体,但是该方法灵敏度太低,而且严重依赖实验人员的经验,实验的
稳定性极差。此外,当该方法检测成阳性时,细胞经常已经严重污染。
目前,细胞培养液中支原体污染的检测通常使用的是PCR 法。但是PCR 法也有明显的缺点:(1)整个过
程大约需要 3 个小时;(2 )由于细胞培养数天后,培养液中经常含有严重抑制PCR 扩增的代谢物,所以样品
的前处理一般是PCR 法不可或缺的环节;(3)PCR 法的灵敏度有限,通常需要将培养液离心浓缩或者抽提DNA
后再检测;(4 )PCR 产物的电泳,需要用到EB 等潜在的致癌物质;(5)需要用到PCR 仪、电泳槽、凝胶成
像仪、离心机等仪器。
《一步法恒温支原体检测试剂盒》使用独特的恒温基因扩增技术,彻底解决了上述 PCR 法的缺点:(1)
整个检测过程只需 1 小时,大大缩短了检测时间;(2 )细胞培养液中的PCR 抑制剂,不会抑制该产品的恒温
基因扩增,所以任何情况下都无需样品的前处理;(3)恒温基因扩增的灵敏度是 PCR 法的 10-1000 倍,检测
只需使用 1 μL 的细胞培养液,无需样品的离心浓缩或者进行支原体DNA 的抽提;(4 )恒温基因扩增的产物无
需电泳,可以通过指示剂的颜色变化直接肉眼判断反应结果;(5)无需用到PCR 仪、电泳槽、凝胶成像仪、
离心机等仪器,整个检测过程只需一个水浴锅。
经测试,本试剂盒至少可以检测以下13 种支原体:(1)M.Hyorhinis 、(2 )M.Fermentans 、(3)M.Arginini 、
(4 )M. hominis 、(5)M. orale 、(6)M. salivarium 、(7)M.pirum 、(8)Acholeplasma Laidlawii、(9)M. agalactiae 、
(10)M.bovis 、 (11)M. buccale 、 (12)M. arthritidis 、 (13)M. pulmonis (注:M. 为Mycoplasma 的缩写)。
其中,前8 种为是最常见的污染细胞的支原体种类,约占污染细胞的支原体的98%左右。以上13 种约占污染细
胞的支原体种类的99%左右。
注意:本试剂盒无法检测Ureaplasma Urealyticum 支原体 (注:该支原体污染细胞的概率极低)!
如果您想得到 100%正确的支原体检测结果(比如,开展细胞治疗的客户,进行干细胞培养的客户,生产
血清、胰酶、培养液的客户,出售各种原代培养细胞系和肿瘤细胞系的客户等),任选本公司生产的《一步法
恒温支原体检测试剂盒》、《PCR 法支原体检测试剂盒》和《发光法支原体检测试剂盒》中的两种进行检测,
将会得到比较满意的结果,检测的正确率应该在 99.9% 以上。如果同时使用这三种试剂盒进行检测,检测的正
确率应该在99.99% 以上。
上海易色医疗科技有限公司() 电话:021邮箱:yisemed@163.com QQ:2743752129
试剂盒组成
(1)溶液1:1150 μL (50 次检测);
(2 )溶液2 :50 μ
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