光损伤视网膜片培养上清液诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为视网膜样细胞的-研究.pdf

光损伤视网膜片培养上清液诱导大鼠骨髓间充质干 细胞分化为视网膜样细胞的研究 硕士研究生： 白月 导 师 ： 徐国兴 教授 摘 要 目的：研究应用 SD （Sprague-Dawley ）大鼠视网膜片光损伤后的培养上清 液，诱导SD大鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs ）在体外跨胚 层诱导为视网膜样细胞的可能性。 方法：1、SD大鼠MSCs 的分离和培养：采用贴壁筛选法分离、培养SD大鼠 MSCs，并用流式细胞仪对细胞纯度进行鉴定。2、SD大鼠视网膜片的取材：在显 微镜下，彻底取下 SD 大鼠视网膜神经上皮层作为视网膜片。并对其常规石蜡切 片HE染色鉴定各层组织结构的完整性。3、视网膜片光损伤：在超净台内，将取 下的 SD 大鼠视网膜片放入盛有 Neurobasal 培养基 A（其中加入 1:50 的 B27 和 0.5M L-glutamine）中，用（1950 ±200) Lux的光照强度照射4