食品安全快速检测技术微生物快速检测专题.pptVIP

大肠菌群测试——纸片法 将乳糖、显色剂和选择性培养基加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。 若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫兰色不变或在紫兰色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。 加水的纸片 大肠杆菌革兰氏染色 电子显微镜下的出血性大肠杆菌 细菌 图1加样后排气泡 图2 大肠菌群阳性（左） 大肠菌群阴性（右） 图3 大肠菌群试管阳性（左） 大肠菌群试剂盒阳性（右） 方法原理：与国标法相同。事先将浓缩乳糖胆盐培养基、亚硒酸盐胱氨酸增菌液、GN增菌液、7.5%氯化钠培养基、包被在试剂盒中，随时取用 观察结果：样液变为黄色为产酸、集气窗中有气泡为产气，既产酸产气的样品为阳性结果，见图2、图3。根据试剂盒的阳性管数，参照国标GB/T4789.3-2003的方法查MPN检索表报告结果。 1. 样品处理：按《食品卫生微生物学检验》GB/T47.10-2003。 2. 加样：将试剂盒放在台面上，打开盒盖，用无菌吸管吸取3个1：10稀释液10mL分别加入试剂盒3个大发酵培养基孔内，用无菌吸管吸取3个1mL分别加入试剂盒3小发酵培养基孔内。另用无菌吸管取1：10稀释后的样品1mL注入到9mL灭菌生理盐水中（1：100）取此管3个1mL稀释液加入到试剂盒另3个小发酵培养基孔内。另用无菌吸管吸取稀释后的样品3个4mL分别加入致病菌增菌管（孔）（A、B、C）孔内。 3. 排气泡: 加样后集气窗内如有气泡存在，可将试剂盒以30～45度角倾斜，（图1）必要时可轻轻用力在桌面敲击数下即可排出集气窗内气泡。 4. 培养：将加样后的试剂盒置36℃± 1℃温箱中，培养18～24h。 样品处理 注意事项 1加入样品后不需摇匀，平拿平放。 2 加样时可用一次性无菌塑料吸管，将样品稀释液加至试剂盒所标刻度处。 3 在培养箱中取试剂盒时应平托出来，不要倾斜以免由于试剂盒的倾斜将阳性管集气窗中的气泡排出而影响结果。 4 试剂盒为一次性无菌用品，供一次性使用。 本章学习要求 了解食品安全微生物指标 掌握食品中菌落总数测试的快速检测技术 返 回 退 出 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 返 回 退 出 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 模块1 绪论 模块1-1 定义和 发展背景 模块1-2 食品安全 现场快速检测 分类及测定原理 返 回 退 出 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 模块1-3 样品采集与检测结果报告 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 返 回 退 出 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 食 品 安 全 快 速 检 测 技 术 及 应 用 北京农业职业学院 7 食品安全快速检测技术及应用 我国细菌性食物中毒中，70% ～ 80%是由沙门菌引起的。 在食品生产、加工、储存、运输、销售等各个环节中都有污染微生物的可能。 一旦污染，微生物将大量繁殖而引起食品腐败变质，或导致食源性感染和食物中毒。 食品微生物快速检测技术的发展趋势 (1)绘制各种菌落图谱，开发在线检测软件，提高检测效率 (2)定量测定微生物细胞特征和性能， (3)克服分子生物学方法的缺点，简化检测程序，使食源性病毒的检测方法向自动化、快速化、灵敏度高、特异性强、重复性好以及简易易行 (4)试验条件标准化及检测的高精度和高灵敏度发展。 菌落：是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成的能被肉眼识别的生长物，它是由数以万计相同的微生物集合而成。当样品被稀释到一定程度，与培养基混合，在一定培养条件下，每个能够生长繁殖的细菌细胞都可以在平板上形成一个可见的菌落。 菌落形成单位叫做CFU（Colony-Forming Units）：是形成菌落的菌落个数，不等于细菌个数。 两相同细菌靠得很近或贴在一起，那么经过培养这两个细菌将会形成一个菌落，此时就是2个细菌，1CFU。菌落总数往往采用的是平板计数法，经过培养后我们数出平板上所生长出的菌落个数，从而计算出每毫升或每克待检样品中可以培养出多少个菌落，于是以CFU/ml或CFU/g报告之。 菌落总数：是指在一定条件下（如需氧情况、营养条件、pH、培养温度和时间等），每克（每毫升）检样所生长出来菌落的总数。 ——用来判定食品被细菌污染的程度及卫生质量，反映食品在生产过程中是否符合卫生要求，以便对被检样品做出适当的卫生学评价。菌