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c-myc蛋白在颅咽管瘤中的表达及意义 陈淳郭川邓发斌周宇(史洋成都市第六人民医院610051) 】目的检测c-myc基因蛋白在颅咽管瘤中表达及特点，探讨它们与肿瘤 复发性及侵袭性的关系。方法将44例颅咽管瘤分为复发和非复发两组，采用免 疫组化(SP)法，检测c-myc基因蛋白。结果c-myc在复发性颅咽管瘤组中的 表达阳性率明显高于非复发性颅咽管瘤组，两组间差异有统计学意义(P lt; 0.05)； 结论c-myc的表达值与颅咽管瘤的复发和侵袭性有关，可以预测肿瘤复发危险 性。 关键词】颇咽管瘤c-myc 】R730 】A 】2095-1752 (2012) 32-0026-02 木研究采取前瞻性队列研究，收集颅咽管瘤病例组成两个队列并观察预 后，应用抗体检测颅咽管瘤组织c-myc蛋白的表达，明确复发组及非复发组的 c-myc蛋白的表达是否有显著性差异及其与肿瘤预后的关系，加深对颅咽管瘤分 子发病机制的认识，探讨它们与肿瘤复发性、侵袭性的关系。我们应用免疫组化 技术，通过检测44例颅咽管瘤中c-myc蛋白的表达情况，探讨颅咽管瘤的复发 与c-myc蛋白表达的相关性，期望通过c-myc蛋白的表达情况能预测颅咽管瘤预 后。 1对象和方法 1.1研究对象 1998年1月?2002年12月在成都市第六人民医院及三六三医院神经 外科接受手术的颅咽管瘤患者病理标木44例，男性23例，女性21例;均为石蜡标 木。木组年龄4?65岁，平均37.34岁。 纳入标准： 1、第一次接受手术，未经放、化疗者； 2、 手术方案由全科室讨论，由有经验的神经外科医生进行手术操作， 术中由以上两位医生共同判断肿瘤是否与下丘脑、Willrsquo;S血管系统粘连或 侵润，肿瘤组织是否达到全切； 3、 肿瘤最大径gt;2cm,术中认为达到全切、术后即复查MRI未见肿瘤 残余； 4、 术后愿接受随访II病历资料完整者。 排除标准： 1、 术前进行过放、化疗者； 2、 术后死因不明者或死于其他明确病因； 3、 病员未顺从复查者； 4、 术后失访者。 44例病人均经显微手术全切，根据手术后1?3年随访MRI明确是否复 发，据此分两组：复发性颅咽管瘤组28例，男性13例，女性15例，年龄6?62 岁，平均38.12岁,非复发性颅咽管瘤组16例，男性10例，女性6例，年龄4?65岁， 平均36.19岁。对照组10例，取材于因脑外伤、脑出血手术内减压时所取周围 脑组织标本。 1.2方法 1.2.1免疫组化(SP)法。 试剂来源 I抗：c-myc(9E10)sc-40 (鼠抗人IgG)北京中杉生物工程公司 II抗：SP超敏试剂盒Kit 9710福州迈新生物工程公司 DAB： ZLI 9032 北京中杉生物工程公司 免疫组化方法 切片常规脱蜡至水 3%H2O2 室温 10 分钟rarr;0.01MPBS 洗片 抗原修复：0.01M枸椽酸缓冲液PH6.0,微波20分钟，中火 封闭：用未免疫的山羊血清封闭30分钟，室温 滴加I抗：4°C过夜 c-myc 1:100 PBS 洗片 5 分钟times;3 滴加II抗：生物素化羊抗鼠（I抗为单抗）或生物素化羊抗兔（I 抗为兔抗）37°C 20 分钟rarr;PBS5 分钟times;3 DAB显色：30秒钟一30分钟左右rarr;水洗 苏木素复染2分钟 脱水透明封片 结果：阳性：棕黄色一一黄色表达于核内，阴性细胞核为兰色 1.2.2图像采集与分析 Olympus-BX51图像采集系统，CCD快速拍照，图像采集由图像技术室 老师施行和作出分析。 1.2.3结果判定抗体染色后细胞核呈棕黄色为阳性，根据每一显微镜视 野下（times;400）抗体阳性染色数计算表达阳性率,30%以上记为表达阳性,30 % 以下为表达阴性（存在非特异性染色）。 1.2.4统计学处理应用SPSS11.5统计软件分析数据，颅咽管瘤c-myc 蛋白表达阳性率的比较采用chi;2检验。 2结果 本组病例44例颅咽管瘤，术后随访1?3年，平均随访23个月。复发 28例，复发率为63.64%,复发时间为8个月?32个月，平均16.7月，其中19 例复发1次，6例复发2次，3例复发3次。 2.1、 c-myc在对照组及颅咽管瘤中免疫组织化学染色结果。 2.2、 c-myc在复发性颅咽管瘤组中的表达阳性率明显高于非复发性颅 咽管瘤组，两组间差异有统计学意义（Plt;0.05）,见表1。 表1 c-myc在复发性与非复发性颅咽管瘤中的表达阳性率（％） P 值lt;0.05 3讨论 c-myc的表达与颅咽管瘤侵袭性和复发性的关系 c-myc癌基因最初是从鸡病毒v-myc癌基因的同源物中分离出来的［1】， 人c-myc原癌基因正常位于人炎色体8q24,编码相关的c