生物化学核酸生合成.pptVIP

例： 复制和转录的共同点: ? DNA 模板 ? 碱基配对规律 ? 生成磷酸二酯键 ? 链延长方向5→3 10-4-10-5 10-9-10-10 差错率 无 有 校正功能 全酶 9种酶和蛋白因子 酶与蛋白因子 不需要 RNA为引物 引物 DNA区段一条链不对称转录 完整两条链双向复制 模板 NTP dDNA 原料 DNA转录 DNA复制 区别： 三、真核生物的转录后修饰（Post-transcriptional Modification） （一）、真核生物mRNA的转录后加工 ?5?端形成 帽子结构(m7GpppGp —) ?3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) ?内含子的剪接 帽子结构： 尾巴结构： 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA mRNA的剪接 C A B D 非编码区 外显子(exon)和内含子(intron) ?外显子：（基因上的编码序列） ?内含子：（基因上的非编码序列） snRNP与hnRNA结合成为并接体 真核生物mRNA的转录后加工修饰 （二）、tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNAaseP、内切酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP （三）、真核生物rRNA的转录后加工 四膜虫前rRNA的自身剪接 核酶（ribozyme）的发现 真核生物和原核生物转录的差别 ? 真核生物中转录与复制在不同的区域 ? RNA聚合酶不相同 ? 启动子不同 ? 转录后RNA加工修饰不同 Simple Introduction of PCR Technology 第三节 PCR技术简介 靶序列 变性和引物复姓 循环1 循环2 循环3 变性和引物复姓 链延伸 Tag酶 链延伸 PCR的基本反应步骤 变性 95?C 延伸 72?C 退火 Tm-5?C 胚胎羊 乳腺上皮细胞 （提供DNA） 母羊 除去细胞核的卵母细胞（受体） 体外融合 植入受体母羊 ！ 本章内容结束，谢谢！ * * * * 五、 DNA损伤(突变)与修复 ?突变 (mutation)： ?DNA损伤 (DNA damage)： （一）、突变的意义 ?突变是进化、分化的分子基础 ?突变导致基因型改变 ?突变导致死亡 ?突变是某些疾病的发病基础 （二）、引发突变的因素 ?自发性: 自然错配率约为10-9～10-10 左右。 ?物理因素: 如UV (ultra violet)、各种辐射。 ?化学因素: 烷化剂、碱基类似物、以及其他一些人工合成或环境中存在的化学物质，这些诱发突变的化学物质,称为致癌剂。 ?生物因素: 抗菌素类、黄曲霉素和病毒等。 物理因素 （三）、突变的分子改变类型 错配 (mismatch) 缺失 (deletion) 插入 (insertion) 重排 (rearrangement) 框移(frame-shift) 镰形红细胞贫血病人Hb (HbS) β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · val · glu · · · · · · C 肽链 CAC GTG 基因 正常成人Hb (HbA)β亚基 N-val · his · leu · thr · pro · glu · glu · · · · · · C 肽链 CTC GAG 基因 ?1949年，波林发现镰刀型细胞贫血症与血红蛋白结构异常相关。 谷 酪 蛋 丝 5’ ……G C A G U A C A U G U C …… 丙 缬 组 缬 正常 5’ ……G A G U A C A U G U C …… 缺失C 缺失引起框移突变 例： （四）、DNA损伤的修复(repairing) ?光修复(light repairing) ?切除修复(excision repairing) ?重组修复(recombination repairing) ?SOS修复 修复的主要类型： 1、光修复 2、切除修复 是细胞内最重要和有效的修复机制，主要由DNA-polⅠ和连接酶完成。 UvrA UvrB UvrC OH P DNA聚合酶Ⅰ OH P DNA连接酶 NAD+ E.coli的切除修复机制 1）首先由UvrA，UvrB蛋白识别并结合DNA的损伤位点，在损伤部位的5’侧由UvrC蛋白切开磷酸二酯键。不同原因造成的DNA损伤需要不同的特殊的核酸内切酶来辨认和切割 2）由5’—3’核酸外切酶将有损伤的DNA片段切除。 3）在DNA聚合酶