甘草炮制原理的初步-研究.pdf

3.1 供试样品制备 23 3.2 供试样品展开 23 4 ．各种甘草饮片与辅料的薄层鉴别24 4.1 供试样品制备 24 4.2 供试样品展开 24 5 ．讨论25 6 ．小结25 第三部分 炙甘草炮制工艺研究 26 1．HPLC 法测定炙甘草饮片中甘草酸、甘草苷含量的研究26 1.1 HPLC 法测定炙甘草饮片中甘草酸含量的研究 26 1.2 HPLC 法测定炙甘草饮片中甘草苷含量的研究29 2 ．正交试验法优选炙甘草炮制工艺32 2.1 仪器设备、供试饮片和试药32 2.2 试验方法和结果33 2.3 甘草蜜炙工艺的优选及确定34 2.4 结论39 第四部分 甘草炮制品的初步药理研究 40 1．试验材料与仪器40 1.1 供试饮片40 1.2 仪器 40 1.3 饮片提取物制备与配制40 1.4 动物及条件40 1.5 剂量 41 1.6 药品与试剂41 2 ．试验方法与结果41 2.1 不同炮制法制备的甘草饮片对脾虚小鼠体重及免疫功能的影响41 2.2 不同炮制法制备的甘草饮片对脾虚小鼠小肠吸收功能的影响49 3 ．药理试验小结与讨论51 3.1 实验动物的选择:51 3.2 动物模型的选用51 3.3 指标的选择51 3.4 试验结论 52 3.5 讨论 52 第五部分 甘草炮制原理的探讨 55 结 语 56 参考文献 58 致 谢 63 查新报告 64 引 言 蜜炙属中药传统炮制法，也是中药炮制的重要组成部分，历来有“蜜制甘缓益元” 之说。蜜制在历史上出现过多种方法，流传至今以“蜜炙”为主流，历版《中国药典》 均收载有“蜜炙”法。 甘草（其中以豆科的乌拉尔甘草 Glycyrrhiza uralensis Fisch.资源分布最广，产量 最大，是市场上的主流品种，作为研究对象）是中医临床常用的大宗中药，素有“十 方九草”之说。历版《中国药典》均收载有甘草、炙甘草。炙甘草是蜜炙技术的代表 性饮片之一，也是甘草入药的主要品种。目前各地制备炙甘草饮片时采用的方法不尽 相同，炮制工艺尚不规范，市场上存在着饮片质量良莠不齐的现象。甘草蜜炙后功能 主治的侧重点转为补益，尤其是补脾的作用得到增强，但炙甘草的功效相关药理研究 非常罕见，甘草炙后各类成分变化的系统研究也未见报道，未能就甘草的蜜炙原理做 较为深入系统地探讨。关于甘草的现代研究已经比较广泛和深入，但鉴于中医药体系 深厚的内蕴，仍有前述若干领域的研究有待加强。甘草炮制基础研究工作的薄弱不但 阻碍了炙甘草饮片质量标准的发展，也引起部分学者对甘草蜜炙法合理性的质疑。因 此有必要确定其工艺，对甘草蜜炙前后的变化进行研究，应用综合药理指标对明显影 响炙甘草品质的各工艺因素及其不同组合进行考察，对其炮制意义初步进行探讨。 饮片的功效与其物质基础有对应关系，本课题分别提取生、炙甘草各类成分、部 位，比较其薄层色谱行为的差异，以期发现甘草炮制后发生变化的成分及部位。以甘 草酸和甘草苷为指标，建立含量测定方法，正交设计优选出炮制工艺。遵循中医理论， 借鉴其他基础学科的方法，用利血平造小鼠脾虚模型以体重、脏器指数、碳粒廓清指 数、血清 D-木糖水平为指标，对甘草各种炮制品的水提物和醇提物进行补脾作用的 初步比较。根据中医药理论及临床经验，甘草不同炮制品对脾虚证的作用存在差异， 比较结果将为此提供实验证据，并揭示不同炮制因素或其组合对甘草补脾作用的影 响，从而可以验证蜜炙法炮制甘草的科学性或为某些理论性的争议提供佐证。本课题 从新的思路入手，为炙甘草的炮制原理研究奠定了部分工作基础，并可为相关工艺、 质量标准研究提供借鉴。 1 第一部分 文献综述 1．蜜炙中药与辅料历史演变概要 中药蜜炙法是一种以蜂蜜为辅料的传统中药炮制技术。现在仍然属于一种常见的 炮制方法，自 1963 年版起该法为历版《中国药典》收载。蜜炙法相关文献多散见于 历代医方、本草中，对该类方法历史沿革的研究极少见。炙甘草是较为典型的蜜炙