《姬松茸液体深层发酵多糖的研究》-毕业论文.docVIP

PAGE 大 连 轻 工 业 学 院 硕 士 学 位 论 文 中文题目： 姬松茸液体深层发酵多糖的研究 英文题目： Studies on the Polysaccharides from Agaricus blazei Murill by Submerged Culture 系（院、所）： 生物与食品工程学院 学科、专业： 食品科学 研究生： 指导教师： 教授 摘 要 本文探索了姬松茸胞内多糖提取的最佳条件，并对所得胞内多糖进行分离纯化及结构和性质的初探。同时对胞外多糖的脱蛋白工艺进行研究，为综合利用姬松茸液体发酵产物奠定基础。 以液体深层培养的姬松茸菌丝体为原料，以多糖提取率为指标，确定水提法提取姬松茸胞内多糖的最优条件。通过DEAE-纤维素柱和Sephadex G-200对所得胞内多糖进行分离纯化。采用凝胶色谱法测定多糖分子量，纸层析法分析单糖组成，光谱分析法初步鉴定多糖结构。用不同乙醇（95％）添加倍数进行胞外多糖的提取，确定提取条件。通过对sevage法、三氯乙酸法和酶法的比较，找出姬松茸胞外多糖脱蛋白的最佳方法及最优条件。 姬松茸液体发酵胞内多糖的最佳提取条件为：提取温度100℃、料液比1:30、提取时间3h、乙醇（95%）添加倍数3倍、提取次数2次，在此条件下，粗多糖的提取率达6.64%。胞内多糖经分离得到三种糖组分ABP = 1 \* ROMAN I、ABP = 2 \* ROMAN II-a和ABP = 2 \* ROMAN II-b，其分子量分别为88500、85400和37000。三种多糖均为蛋白聚糖，其中ABP = 1 \* ROMAN I和ABP = 2 \* ROMAN II-a的糖链结构主要由吡喃型葡萄糖通过α-糖苷键连接而成，ABP = 2 \* ROMAN II-b的糖链结构主要由吡喃型葡萄糖通过β-糖苷键连接而成。胞外多糖得率在乙醇添加倍数为3时最高。酶法对姬松茸胞外多糖脱蛋白的作用效果优于sevage法和三氯乙酸法，中性蛋白酶的最适酶解条件为：温度50℃、pH7、加酶量100u/g、时间1.5h。此条件下的蛋白质含量为0.3028mg/mL胞外液，减少了41.97％；多糖得率为0.8713 mg/mL胞外液，提高了7.51％。 采用本文的培养方法和提取条件，显著的增加了姬松茸胞内多糖的提取率。通过对胞外多糖提取及纯化的研究，做到了对液体发酵产物的综合利用，促进了姬松茸这一珍贵食用菌资源的开发利用。 关键词： 姬松茸，液体发酵，胞内多糖，胞外多糖 Abstract It was studied in this paper to obtain the optimum extraction conditions of intracellular polysaccharides from Agaricus blazei Murill by submerged culture. Then the structure and some properties of intracellular polysaccharides were discussed after they were isolated and purified. In order to comprehensively utilize the submerged culture products, the methods to remove the protein from the fermentation liquid of Agricus blazei Murril were studied. The optimum extraction conditions of intracellular polysaccharides from Agaricus blazei Murill mycelium were determined according to the yield of crude polysaccharides. DEAE-Cellulose and Sephadex G-200 column were used to isolate and purify intracellular polysaccharides. The molecular weights were estimated by Sephadex G-200 column. The compositions and the structure of intracellular polysaccharides were analyzed by paper chromatography, UV and IR. The ex