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湖 南 农 业 大 学 全日制普通本科生毕业论文 黄瓜绿斑驳花叶病毒分子的鉴定及其检测 Cucumber green mottle mosaic virus molecular identification and detection 学生姓名： 学 号： 200841634103 年级专业及班级： 2008级生物信息学(1)班 指导老师及职称： 教授 学 院： 生物安全科学技术学院 湖南·长沙 提交日期：2012年6月 目 录 摘 要……………………………………………………………………………………1 关键词…………………………………………………………………………………1 1 前言…………………………………………………………………………………1 1．1 黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)的研究现状……………………………………2 1.1.1 CGMMV的分类………………………………………………………………2 1.1.2 CGMMV病毒生物学特征…………………………………………………………3 1.1.3 CGMMV症状特征…………………………………………………………………3 1.1.4 CGMMV传播方式…………………………………………………………………3 1.2黄瓜绿斑驳花叶病毒检测技术与病毒病害的防治………………………………3 1.2.1黄瓜绿斑驳花叶病毒检测技术…………………………………………………4 1.2.2 病毒病害的防治…………………………………………………………………4 2 CGMMV实验材料与方法………………………………………………………………4 2.1 实验材料……………………………………………………………………………4 2.2 RNA提取方法………………………………………………………………………4 2.3 RT-PCR检测…………………………………………………………………………5 2.4 PCR产物的测定及分析………………………………………………………………5 3实验结果………………………………………………………………………………5 3.1 PT-PCR检测…………………………………………………………………………5 3.2 序列分析……………………………………………………………………………6 4.讨论…………………………………………………………………………………7 5.参考文献………………………………………………………………………………8 黄瓜绿斑驳花叶病毒分子的鉴定及其检测 学 生：屈建龙 指导老师：高必达 （湖南农业大学生物安全科学技术学院，长沙 410128） 摘 要：黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)主要靠种子传播，就是葫芦科上的重要病毒之一,该病毒属于烟草花叶病毒属(Tobamovirus), 给葫芦科作物的生产造成严重威胁。本实验通过对国家蔬菜工程技术研究中心培育的 “京欣砧王”砧木种子进行RT-PCR检测，初步建立了直接对种子中CGMMV进行RT-PCR检测的方法，为CGMMV的检测提供了一定依据。我们将检测到的分离物命名为CGMMV-JS，并进行了同源性分析，发现CGMMV-JS的RT-PCR扩增产物的序列与辽宁LHP株系,韩国的NS株系的序列同源率达到100%，结合以CP基因为基础构建的系统发育树，我们推测CGMMV-JS极有可能是由韩国传入我国。 关键词：RT-PCR；黄瓜绿斑驳花叶病毒；砧木种子 Cucumber green mottle mosaic virus molecular identification and detection Studengt : Qu Jian Long Tutor : Gao Bi Da (College of Bio-safety Science Technology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China) Abstract Cucumber green mottle mosaic virus ( Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV ) mainly by seed propagation, is the important one of the