实验四-温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响.pptVIP

实验四 温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响 一、实验目的 1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶最适温度的方法。 2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。 二、实验原理（一）温度对酶活性的影响 （二）激活剂对酶反应的影响 激活剂大部分是一些无机离子和小分子有机物。这些物质可与酶分子上的氨基酸侧链基团结合，可能是酶活性部位的组成部分，也可能作为辅酶或辅基的一个组成部分起作用。 一般情况下，一种激活剂对某种酶是激活剂，而对另一种酶则起抑制作用； 对于同一种酶，不同激活剂浓度会产生不同的作用。 （三）抑制剂对酶反应的影响 抑制剂能与酶分子上某些必须基团结合,使酶的活性中心的化学性质发生改变，导致酶活力下降或丧失。酶的抑制剂一般具备两个特点： 1、在化学结构上与被抑制的底物分子的过渡状态相似。 2、能够与酶的活性中心以非共价或共价的方式形成比较稳定的 复合体。 三、试剂和器材 (二) 激活剂和抑制剂对酶活性的影响 五、注意事项 1、本实验中的保温时间分别是5min或10min，但不同的唾液淀粉 酶的活性是不同的，如果没能得到理想的颜色梯度，则需要根据先前的现象结果适当调整酶浓度或反应时间。 2、 加入酶液后务必充分摇匀，保证酶与淀粉溶液充分混匀，反应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。 * * * 一方面是温度升高,酶促反应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导致酶活性降低甚至丧失。 因此大多数酶都有一个最适温度(即 酶促反应速度最快时的环境温度) 酶的最适温度不是一个常数，它与作用时间长短有关。 剂i] 1、实验器材： (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃棒 (6)白磁板 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试管夹 (11)试管架 (12)秒表 2、实验试剂 (1) 0.2%淀粉的0.3%氯化钠溶液 (2) KI-I2 (4) 1%NaCl (5) 1%CuSO4 6) 1%Na2SO4 (7) 0.1%淀粉溶 (8) 唾液淀粉酶 四、操作步骤 （一）温度对酶活性的影响 取3支试管，编号，按下加入试剂，摇匀后，将1号、3号试管放入37℃恒温水浴中，2号试管放入冰水中。10 min后取出，将2号管内液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录结果，将2号管剩下的一半溶液故入37℃水浴中继续保温10 min后，再用碘液实验，结果如何? 1 － － 煮沸的稀释唾（ml） － 1 1 稀释唾液（ml） 1.5 1.5 1.5 淀粉溶液（ml） 3 2 1 管 号 记录结果 1-2滴 1-2滴 1-2滴 1-2滴 KI-I2（滴） 摇匀，置37℃水浴中10分钟，取出冷却。 1.0 1.0 1.0 1.0 唾液淀粉酶 1.5 1.5 1.5 1.5 0.1%淀粉（ ml ） — 1.0 — — 1%Na2SO4（ ml ） 1.0 — — — 蒸馏水（ ml ） — — 1.0 — 1%CuSO4（ ml ） — — — 1.0 1%NaCl（ml） 4 3 2 1 试 剂 管 号 剂i] *