巴贝虫检测血涂片镜检法.PDFVIP

ICS 11.020 C 61 WS 中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准 WS/T632—2018 巴贝虫检测 血涂片镜检 DetectionofBabesiaspp.——Bloodsmearmicroscopyexaminationmethod 2018-09-2 发布 2019-04-01实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发 布 WS/T 632—2018 前  言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由国家卫生标准委员会寄生虫病标准专业委员会提出。 本标准起草单位 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所、第二军医大学、中国农业科学院上 海兽医研究所。 本标准起草人：张仪、周晓农、刘琴、陈韶红、朱淮民、周金林。 I WS/T 632—2018 巴贝虫检测 血涂片镜检 1 范围 本标准规定了检测巴贝虫的血涂片镜检法。 本标准适用于各级疾病预防控制机构和医疗机构对巴贝虫的检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 WS/T569 疟原虫检测 血涂片镜检法 WS/T564 巴贝虫病诊断 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 巴贝虫 Babesiaspp. 一类寄生于人和脊椎动物红细胞内的原虫，可引起巴贝虫病（Babesiosis）。感染人体的巴贝虫有 田鼠巴贝虫(Babesia microti)、分歧巴贝虫(B.divergens)、邓肯巴贝虫(B.duncani)和猎户巴贝虫(B. venatorum)等。 3.2 血涂片 bloodsmears 将血液涂制于载玻片上制成的涂片, 分为厚血膜涂片和薄血膜涂片。 4 仪器和器材 4.1 光学显微镜（100×油镜、10×目镜） 4.2 血涂片染色架 4.3 血涂片干燥架 4.4 玻片盒 4.5 染色盘和染色缸 1 WS/T 632—2018 4.6 计数器 5 试剂和材料 5.1 吉氏染色原液（Giemsa) 5.2 pH7.2磷酸盐缓冲液（PBS） 5.3 标准级载玻片 （洁净载玻片，或表面带正电荷的粘附玻片） 5.4 甲醇 （分析纯） 5.5 香柏油或专用浸油 （折射率≥1.5） 5.6 二甲苯 （分析纯） 5.7 甘油 6 检测步骤 6.1 血涂片的制作 6.1.1 采血部位及取血方 末梢 （无名指指尖或耳垂）取血。用75％酒精棉球消毒取血部位，待酒精挥发后，用拇指和食指紧 捏耳垂上方或无名指指尖，另一只手手持一次性采血针迅速刺入皮肤，轻轻挤压出血。婴儿可从拇趾或 足跟扎刺取血。 6.1.2 厚血膜制作 取 1张已消毒的载玻片 （或粘附玻片）作推片，用推片的一角，取 4µL～5µL的血量，使血与另 1 张平置的载玻片（或粘附玻片）中央偏右的位置接触，由里向外旋转，画 2 圈～4 圈，涂成直径 0.8cm～ 1cm大小圆形厚血膜（见附录A）。 6.1.3 薄血膜制作 干棉球抹