血管内皮生长因子在胚胎成骨细胞中的表达-研究与应用.pdf

中文摘要 毒载体，将胚胎成骨细胞进行体外培养扩增传代，以进入对 数生长期的成骨细胞为靶细胞进行转染，测绘转染前后各自 生长曲线。免疫组化染色及免疫荧光定性分析转染后目的基 因在靶细胞中的表达情况。并通过流式细胞技术定量检测成 骨细胞中的目的基因转染率。 结果：1成骨细胞的培养及观察 培养的原代成骨细 胞约5—7天爬满培养瓶，倒置显微镜下观察生长期贴壁后 的成骨细胞多呈梭形或三角形或多角形，圆形或椭圆形的细 胞核居中或偏于细胞一侧，有较多突起，单核或1．3个核仁， 胞质丰富、清晰。生长期细胞分裂相多见，细胞突起相互联 接。细胞表面有数量不等、长短不一的突起伸出，细胞呈集 落化生长趋势可复层生长，形成细胞结节甚至团块状。 2扫描电镜下可见成骨细胞有多个突起，表面较多突 起，形态饱满。细胞间由突起互相联接。 胞胞质中呈现灰黑色颗粒或块状沉淀。 4矿化结节染色(茜素红法)后，肉眼见矿化结节呈现 不同的红色团块。 5Giemsa染色法，见胞浆丰富染成粉红色，细胞核染成 紫蓝色，成圆形或卵圆形，位于细胞中央或偏向一侧，核仁 明显。 6VEGF转染前、后细胞生长曲线对照：转染后成骨细 胞的增殖较未转染的同代空