试验室安全教育及荧光显微镜.PPT

5、多色荧光标记检测 普通荧光显微镜每次只能观测一种荧光，要观测多种荧光标记的样品需要多次观测，对样品损伤大。激光共聚焦显微镜可以多激光多通道同时扫描，多通道同时探测。 绿色：SYBR 14染色，活精子 红色：PI染色，死精子 肺动脉内皮细胞 蓝色：Hoechst 33342 ，染DNA 红色：PI，染核仁RNA 绿色：Alexa Fluor 488染肌丝蛋白 常用荧光探针介绍 细胞活性探针 细胞器探针 细胞骨架探针 核酸探针 细胞内离子探针 细胞活性探针 活细胞探针：吖叮橙（AO） 是一种离子泵活性指示剂，弱碱性，在动物细胞溶酶体、植物液泡和含胰岛素的分泌小粒等酸性细胞器中浓集。 死细胞探针：碘化丙锭（PI） 膜不透性DNA探针，细胞膜破损后与DNA结合 细胞器探针 线粒体探针：罗丹明123（Rhodamine123），能渗入细胞，带阳离子的荧光探针，不染色内质网。 溶酶体探针：中性红（Neutral Red） 内质网探针：DiOC6属于短链碳酸花青苷染料。可标记活细胞内质网，也可用于甲醛固定的细胞内质网。 细胞骨架探针 F-肌动蛋白荧光探针： 鬼笔环肽：特异性地与F-肌动蛋白荧光探针结合，纳摩尔浓度下也可标记 核酸探针 吖叮橙（AO） 与DNA结合，发射波长525nm，显绿色与RNA结合，发射波长650nm，显红色 Hoechst 与DNA结合，分辨率高