《第二章生产中常用菌种的分离选育和保藏》-课件设计.pptVIP

第二章 发酵工业常用微生物及培养 带图象分析系统的微生物菌种显微观察装置 二、菌种的来源 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买； 从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。 采样：有针对性地采集样品。 增殖：人为地通过控制养分或培条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 分离：利用分离技术得到纯种。 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 （一）采样 1. 采样对象：以采集土壤为主，也可以是植物， 腐败物品，某些水域等。 2. 采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。 3. 采土方式：在选好适当地点后，用小萨子除去 表土，取离地面5-15cm处的土约 10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋 中，扎好，标记，记录采样时间、 地点、环境条件等，以备查考。 （二）增殖培养 为了容易分离到所需的菌种，让无关的微生物在数量上不要增加，可以通过配制选择性培养基，选择一定的培养条件来控制。 例如碳源利用的控制，可选糖，淀粉、纤维素，或者石油等，以其中的一种为唯一碳源，那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而其它微生物就可能死亡或淘汰。这样对下阶段的纯种分离就会顺利得多。 （三）分离筛选 尽管通过增殖培养效果显著，但还是处于微生物的混杂生长状态。因此还必须分离，纯化。在这—步，增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用，而且控制得细一点。纯种分离的方法有划线分离法、稀释分离法。 这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件，通过三角瓶的容量进行小型发酵试验，以求得适合于工业生产用菌种。 （四）发酵性能测定 生产性能：发酵周期、产品品种和产量等 安全性能：自然界的一些微生物是在一定条件下产毒的，将其作为生产菌种应当十分当心，尤其与食品工业有关的菌种，更应慎重。 据有的国家规定，微生物中除啤酒酵母、脆壁酵母、黑曲霉、米曲霉和枯草杆菌作为食用无须作毒性试验外，其他微生物作为食用，均需通过两年以上的毒性试验。 四、自然界中细菌的分离 采样的注意事项 采样时应尽可能保持相对无菌； 所采集的样本必须具有某种代表性； 采好的样必须完整地标上样本的种类及采集日期、地点以及采集地点的地理等； 应充分考虑采样的季节性和时间因素，因为真正的原地菌群的出现可能是短暂的； 采好的样应及时处理，暂不能处理的也应贮存于4℃下，但贮存时间不宜过长。 采样和采集方法 为了从一特定生态系统中分离出具有代表性的细菌菌群，特别是分离那些在唯一微环境区域中出现的菌群时，必须十分重视样本的采集。 样本采集时所需的工具通常有无菌刮铲、土样采集器、镊子、解剖刀、手套、无菌小塑料袋和塑料瓶等。 1．土样采集方法 森林、旱地，草地可先掘洞，由土壤下层向上层顺序采集； 水田等浸水土壤在不损土层结构的情况下插入圆筒采集，可取离地面5～15cm处的土。将采集到的土样盛入聚乙烯袋或玻璃瓶中。 在采集植物根际土样时，一般方法是自土壤中慢慢拔出植物根，在大量无菌水中浸渍约20min，洗去粘附在根上的土壤，然后再用无菌水漂洗下根部残留的土，这部分上却为根际土样。 2．水样采集方法 用于细菌检测的水样应收集于100m1干净、灭菌的广口塑料瓶中。 由于表层水中含有泥沙，故在采样时应在较深的静水层中采集水样。 方法是：握住采样瓶底浸入水中30-50cm处，然后瓶口朝下打开瓶盖，让水样进入。如果有急流存在的话，应直接将瓶口反向于急流。采集瓶从水中取出时应迅速并带有较大的弧度。水样不应装满采样瓶。所有水样都应在24h之内迅速进行检测，或者4℃下贮存。 ２.２　菌种选育 菌种的选育： 是运用生物遗传和变异原理，用人工方法造成变异，经过筛选，得到使现存的优良性状强化，或去除不良性质或增加新的性状的工业菌种的过程。 2 诱变育种 诱变育种：以诱发突变为基础的育种，是迄今为止国内外提高菌种产量、性能的主要手段。 一、诱变剂 物理诱变剂： 如紫外线、X—射线、γ—射线，　 物理因素中目前使用得最方便而且十分有效的是紫外线。许多高产菌株的选育都用过紫外线，对于一般实验室、中小型工厂都适用，也很安全。 　　　　　　　 化学诱变剂 化学因子如碱