免疫组化及原位杂交.pptVIP

如： 一抗: mouse anti-CD45 rabbit anti-CD20 二抗: FITC-goat anti-mouse IgG TRITC-goat anti-rabbit IgG (green) or TRITC-donkey anti-rabbit IgG (red) 优点：增加了敏感性。 缺点：需用3-4种抗体，且一抗不能来源于同一种属。由于所用 的抗体来源于不同种属，存在交叉反应的可能性，使用前 需进行种属间的交叉实验。 B)也可先完成第一套抗体显示第一抗原，再进行第二套抗体显示第 二抗原。 ②第一抗体来源于同一种属，可采取以下方法进行： A)在完成第一套抗体显示第一抗原及保存了相应的图像后，用微波 处理灭活第一套抗体，再进行第二套抗体显示第二抗原。两套二 抗可以是来源于同一种属，也可以不是, 但须标记不同荧光染料。 B)在完成第一套抗体显示第一抗原后，用饱和的与第一套一抗同一 种属的免疫球蛋白封闭第一套抗体中二抗的未结合位点，再用荧 光标记的第二套一抗直接进行第二抗原的显示。