离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理及分析.docx

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动物生理学实验报告 Effects of adrenaline,aceytlcholine, potassium and calcium ions on isolated toad heart Groups heart rate 振幅(g) 基线变化   control perfusion control perfusion control perfusion 5%Na+ 11 11 3.55 3.44 正常 峰略降低 2%Ca2+ 14 15 3.7 4.01 正常 峰略增高 1%K+ 21 19 3.52 3.31 正常 峰较多降低 1:100000 Adr 16 30 4.26 5.35 正常 峰急剧增高 1:1000000 Ach 25 18 3.55 3.39 正常 频率急剧下降,峰急剧降低 实验四 离体蟾蜍心脏灌流实验数据处理与分析 步骤一:向插管中加入1ml任氏液,心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线45s。 加入试剂 无 心率(次/分) 16 平均收缩张力(g) 4.26 心脏表现 正常跳动 现象分析 步骤二:在任氏液中加入1:100000肾上腺素溶液1-2滴,心搏曲线稳定后记录45s。 加入试剂 肾上腺素 心率(次/分) 30 平均收缩张力(g) 5.35 心脏表现 剧烈加速跳动,现象十分明显 现象分析 加肾上腺素心肌收缩能力增强,是因为肾上腺素与心肌细胞膜上的β1受体结合,心肌细胞和肌浆网膜Ca通透性增强,肌浆中Ca浓度增加,心肌收缩能力增强。 步骤三:用任氏液洗脱3次,加入1-2ml任氏液,待曲线稳定45s后,向灌流液中加5% NaCl溶液2-6滴,心搏曲线稳定后记录45s 。 加入试剂 5% NaCl 心率(次/分) 11 平均收缩张力(g) 3.44 心脏表现 心脏跳动微弱缓慢 现象分析 加入NaCl后心跳减弱是由于心肌收缩活力是由Ca离子触发的,心肌收缩的强弱与细胞外Ca离子的浓度成正比,当Na+明显增高时,膜内外钠的浓度差梯度增大,因此,快反应细胞Na+内流加快,0期去极速度和幅度均增加,导致传导性和自律性增高。同时Na+内流的增多促进细胞内Ca2+的外运使细胞内Ca2+浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱。 步骤四:用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1-2ml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加1% KCl溶液1-2滴,心搏曲线稳定后记录45s 。 加入试剂 1% KCl 心率(次/分) 19 平均收缩张力(g) 3.31 心脏表现 心脏跳动微弱 现象分析 加入KCl后细胞外K升高,K与Ca在细胞膜上有竞争性抑制,K抑制细胞膜对Ca转运所以进入细胞内Ca减少,所以心肌的兴奋收缩联过程减弱,因此心肌收缩力降低。 步骤五:用任氏液洗脱数次,曲线基本恢复后,加入1-2ml任氏液,待曲线稳定45s后,在任氏液中加2%CaCl21-2滴,心搏曲线稳定后记录45s 。 加入试剂 2%CaCl2 心率(次/分) 15 平均收缩张力(g) 4.01 心脏表现 心脏跳动收缩力加强 现象分析 加入CaCl后,心肌收缩增强,因此心肌的收缩活性与心肌肌浆中Ca离子浓度的高低有关,当Ca离子浓度升高至10-5M水平时,作为钙受体的肌钙蛋白结合了足够的Ca离子,引起肌钙蛋白分子构型的改变,从而触发肌丝滑行,肌纤维收缩,当肌浆中Ca离子浓度降至10-7M时,Ca离子与肌钙蛋白解离,心肌随之舒张,用高Ca离子灌注心脏,使肌浆中Ca离子浓度不断升高,Ca离子与肌钙蛋白结合数量不断增加,于是心肌持续收缩。 步骤六:将上述溶液吸出,用新鲜任氏液换洗数次,加入1-2ml任氏液,待曲线稳定后记录45s ,在任氏液中加1:1000000 的 ACh溶液1-2滴,心搏曲线稳定后记录45s 。 加入试剂 ACh 心率(次/分) 18 平均收缩张力(g) 3.39 心脏表现 心脏几乎停止跳动 现象分析 加乙酰胆碱心脏收缩能力减弱,是因为乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合使心肌细胞膜K通道的通透性增强,促使K外流,最大复极电位水平升高,自律性降低,并且乙酰胆碱可直接抑制Ca通道使Ca内流减弱,心肌收缩能力降低。

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