大豆异黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制探讨-病理学与病理生理学专业论文.docx

目 录 1．中文摘要?????????????????????????? 1 2．英文摘要?????????????????????????? 3 3．论文正文 前言???????????????????????????? 6 材料与方法????????????????????????? 8 结果???????????????????????????? 16 讨论???????????????????????????? 24 4．结论???????????????????????????? 31 5．参考文献?????????????????????????? 32 6．致谢???????????????????????????? 36 7．附录 附录 A 英 中 文 术 语 缩 略 语 对 照 表 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 37 附 录 B 个人简历及发表论文???????????????? 38 附录 C 综 述 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 39 大豆异黄酮对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 及其机制探讨 中文摘要 目的：1.观察大豆异黄酮(SI)对大鼠全脑缺血再灌注损伤后脑组织 bcl-2、Bax 的 表达及 NO、NOS 的影响。2.探讨 SI 对脑缺血再灌注损伤后脑细胞的神经保护机 制。 方法：成年 Sprague-Dawley 大鼠 50 只，随机分为 5 组：假手术组，缺血再灌组， 大豆异黄酮预处理低、中、高剂量组，每组 10 只。大豆异黄酮预处理各组连续 21d 分别按 60mg/kg、120mg/kg、240mg/kg 灌胃，余下两组等体积的生理盐水灌 胃。满 21d 后，假手术组仅行手术，不予缺血；余四组均以三血管(双侧颈总动脉 及基底动脉)阻断法建立全脑缺血再灌注损伤模型，以脑电图变为平直作为全脑缺 血鉴定标志。缺血 1h 后进行再灌 1h。动态监测脑电图变化，光镜下观察脑组织 病理形态学变化,生化检测脑组织 SOD 活性、MDA 含量、NO 含量、T-NOS 及 iNOS 活性，免疫组织化学法定性检测脑组织 bcl-2、Bax 免疫反应阳性细胞平均计数， 半定量 RT-PCR 法检测大脑皮层 bcl-2 mRNA、Bax mRNA 表达情况。 结果：1、病理学改变：假手术组脑组织神经细胞数目基本正常，形态正常，胞体 饱满，胞浆淡染，核仁明显。缺血再灌注组脑组织损伤严重，脑组织正常结构消 失，形态学改变明显，神经细胞及胶质细胞均肿胀，变性坏死，胞膜不清，胞核 固缩，间质水肿明显，细胞及血管周围间隙增大。而大豆异黄酮各组病变轻微， 多数细胞保存完好，神经细胞及间质细胞仅有轻微水肿，胞膜完整，核仁清晰可 见。 2、生化检测结果显示：再灌组与假手术组相比，SOD 活性明显降低(P0.05)， MDA 含量、T-NOS 活性、iNOS 活性、NO 含量均显著升高(P0.05)。用不同剂量 的大豆异黄酮干预后，SOD 活性较再灌组均明显升高(P0.05)，但低于假手术组 (P0.05)；MDA 含量、T-NOS 活性、iNOS 活性、NO 含量较再灌组均明显降低 (P0.05)，但高于假手术组(P0.05)。各用药组之间，中剂量组较其他两组相比差 异显著(P0.05)。 3、免疫组化检测结果显示：假手术组仅见微量的 bcl-2 和 Bax 阳性细胞表达。再 灌组与假手术组相比，bcl-2 表达有所升高(P0.05)，Bax 表达显著增强(P0.05)， bcl-2/Bax 比值有所降低。SI 各组与再灌组相比，除低剂量组外，bcl-2 阳性细胞数 目明显增多(P0.05)，而 Bax 阳性细胞数目均显著降低(P0.05)，bcl-2/Bax 比值有 所升高；SI 各组间中剂量组 bcl-2 表达升高最明显，Bax 表达降低也最明显， bcl-2/Bax 比值升高的最显著(P0.05)。 4、半定量 RT-PCR 检测结果显示：正常脑组织 bcl-2 mRNA 未见明显表达，Bax m RNA 有低水平的表达。再灌组 bcl-2 mRNA 表达有所增多(P0.05), Bax mRNA 表达显著增加(P0.05)，bcl-2/Bax 比值显著性降低(P0.05)。大豆异黄酮各组 bcl-2 mRNA 表达均明显高于缺血再灌组(P0.05)；Bax mRNA 表达较再灌组相比明显 降低 (P0.05) ， 但 高 于 假 手 术 组 (P0.05) ； bcl-2/Bax 比值显著高于再灌注组 (P0.05)。三个剂量组之间 bcl-2 mRNA 和 Bax mRNA 表达，中剂量与低剂量组相 比 差 异 显 著 (P0.05) ， 而 高 剂 量 组 与