放疗联合Disulfiram药物治疗子宫内膜 癌的疗效研究-妇产科学专业论文.docx

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在国内外导师的指导下，独立进 行研究所取得的成果。除文中已注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本人的研究作出重要贡献的个人和 集体，均已经在文中以明确的方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者： 日期： 年 月 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文与相关的职务作品，知识产权归属郑州大 学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有 关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权 郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索，可以采用 影印、缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、 使用学位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时，第一署名单位仍 然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者： 日期 年 月 日 本 课 题 由 美国国立卫生研究院（NIH）RO3 项目（CA141086）、R01 项 目（1CA138188）及中国国家留学基金委（201407040027）基金 资助， 在 此 深 表 感 谢！ 摘 摘 要 放疗联合 Disulfiram 药物治疗子宫内膜癌的疗效研究 博士研究生：刘 灵 导 师：张 展 郑州大学第三临床学院 河南 郑州 450052 摘 要 研究背景 近几十年来，由于子宫内膜癌呈现世界性的高发病率，其死亡人数高于同 期卵巢癌及宫颈癌患者，使得研究界及医疗界对子宫内膜癌的关注日趋上升， 因此如何改善对子宫内膜癌患者的治疗疗效尤显重要。 对于多数子宫内膜癌患者的治疗，手术仍是其主要的治疗方式。但对于低 分化或无分化型的 I 型子宫内膜样腺癌，以及Ⅱ型非腺癌类的子宫内膜癌患者， 治疗后的原位复发率较高，5 年生存率低于 50%，称之为高危型子宫内膜癌。对 于此类患者，在手术治疗的同时，辅助放疗（RT）是其最主要的治疗方式。但 临床资料显示，放疗并不能改善高危型子宫内膜癌患者的长期生存率。放疗在 杀伤普通肿瘤细胞的同时，不能有效的杀伤对放疗具有耐受性的肿瘤干细胞 (CSC)，使得学界对放疗提出了诸多质疑。 肿瘤干细胞具有自我更新及分化的潜能，因此具有高度的成瘤性，在一定 条件下，还可与非肿瘤干细胞之间形成双向性转化，其调控机制可能与一群细 胞转录因子关系密切，称为干细胞转录因子（STFs）。在子宫内膜癌中，体内、 体外实验均证实有肿瘤干细胞的存在，其中干细胞转录因子 SOX9、Nanog、 HER2、OCT4 和 Slug 等可能参与了对子宫内膜癌中肿瘤干细胞的调控及肿瘤的 复发过程。因此我们在杀伤肿瘤细胞的同时，如何下调肿瘤干细胞转录因子的 表达，从而靶向性杀伤肿瘤干细胞，将成为有望攻克肿瘤的新方向。 乙醛脱氢酶（ALDH）是参与氧化代谢的酶，其中 ALDH1 在子宫内膜癌中 I 具有干细胞特性的肿瘤细胞中表达异常增高，ALDH+已作为标志物用于对肿瘤 干细胞的检测，有望成为治疗肿瘤干细胞的新靶点。Disulfiram（DSF）是 ALDH 不可逆的抑制剂，作为戒酒药已被 FDA 批准而广泛使用多年，具有价格低廉、 副反应轻，可长期给药的优势。临床上 DSF 用于戒酒可每日口服片剂 250 – 500 mg，并能长期服用，尚未观察到明显的副反应发生，平均药物代谢血浆浓度为 7.2 – 27 μM。近年发现 DSF 能与铜离子（Cu2+）结合，形成 DSF 和 Cu2+复合物 （DSF/Cu），通过多种途径抑制肿瘤细胞的生长，促进凋亡。Cu2+在正常组织中 表达极少，而在 CD133 表达阳性（CD133+）的肿瘤干细胞区域富集最明显。Cu2+ 这一区域分布的差异性，使得 DSF/Cu 能靶向性杀伤肿瘤干细胞成为可能。但目 前对 DSF/Cu 的抗肿瘤作用机制尚不清楚。本课题组前期研究显示，DSF/Cu 能 通过抑制乳腺癌细胞中 NF-?B 的活性，下调 HER2、MYC 等干细胞转录因子的 表达，从而逆转乳腺癌非肿瘤干细胞向肿瘤干细胞的转化。在子宫内膜癌中， SOX9、OCT4 和 HER2 等因子与肿瘤干细胞功能的维持关系密切，并具有 NF-?B 的结合位点。因此 DSF/Cu 是否能通过对 NF-?B 通路的下调，抑制干细胞转录 因子的表达，实现对子宫内膜癌中肿瘤干细胞的治疗作用有待研究。 本课题选用人类低危型子宫内膜癌 Ishikawa 细胞系及人类高危型子宫内膜 癌 AN 3CA 细胞系作为研究对象，首先检测放疗对其肿瘤干细胞数量及功能的 影响，接着检测放疗联合 DSF 药物对以上两种人类子宫内膜癌细胞系及人类子 宫内膜癌动物模型的治