单次鼻腔给予胰岛素对异丙酚引起的tau蛋白过度磷酸化影响的实验分析-神经病学专业论文.docx

华中 科技 大 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 单次鼻腔给予胰岛素对异丙酚引起的 tau 蛋白过度磷酸化影响 的实验研究 摘 要 目的 ：探讨单次鼻腔给予胰岛素对异丙酚引起的 tau 蛋白过度磷酸化的影响及机制。 方法：SD 大鼠，雄性,8 周，给予以下处理：鼻腔给予胰岛素（3ml:300IU）或生理盐 水 42μl,半小时后腹腔注射异丙酚 150mg/kg 或等体积脂肪乳，一个小时后颈椎脱臼法 处死，取双侧海马组织，通过 Western blot 检测 tau 蛋白 Thr205 位点的磷酸化，GSK-3β、 AKT、ERK、PP2A 活性的变化。 结果：异丙酚引起 tau 蛋白 Thr205 位点的过度磷酸化,这种变化与磷酸激酶 GSK-3β、 AKT、ERK 的活性变化关系不大，而主要可能由于磷酸酶 PP2A 总量下降所致。单次 鼻腔给予胰岛素并没有逆转异丙酚引起 tau 蛋白 Thr205 位点的过度磷酸化。 结论：单次鼻腔给予胰岛素并不能对异丙酚引起的相关异常变化产生显著的保护作 用，采用胰岛素作为术后认知功能障碍的保护措施尚需进一步研究。 关键词：胰岛素；异丙酚；tau 蛋白；过度磷酸化 Research on effect of single intranasal insulin delivery on propofol induced tau hyperphosphorylation Abstract Objective ： To investigate the impact of single intranasal insulin delivery on propofol- induced tau hyperphosphorylation. Methods：SD rats (8 weeks old, male) were treated with intranasal insulin or 0.9% saline 30 minutes before intraperitoneal (i.p.) injection of propofol or equivalent amount of vehicle, and were sacrificed by decapitation 1 h following i.p., The hippocampi were collected and analyzed by Western blot developed with antibodies against phosph-tau (Thr205), GSK-3β, phosph-GSK-3β(Ser9), AKT, phosph-AKT (Ser473) , ERK, phosph- ERK and PP2A-C. Results：Propofol induced a dramatic hyperphosphorylation of tau, which was approved to be resulted from the decrease of PP2A rather than the activation of tau kinases. Single intranasal insulin delivery did not prevent the changes induced by propofol. Conclusions：Single intranasal insulin delivery can not prevent the hyperphosphorylation of tau at Thr 205 induced by propofol. Further studies are still needed to confirm the protective role of insulin on anesthesia-induced hyperphosphorylation of tau. Key words: insulin; propofol; tau; hyperphosphorylation 前 言 阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease, AD）以认知功能障碍及行为损害为主要临床 表现，神经纤维缠结（NFT）及神经炎性斑（SP）为主要病理特征。Tau蛋白是一种 微管相关蛋白，各种遗传或外界因素导致tau蛋白过度磷酸化，与微管结合能力下降， 引起微管解聚，导致神经纤维缠结形成。在AD患者中,NFT的数量与认知功能衰退的 严重程度呈正相关（1）。老年斑（SP）是β淀粉样蛋白(β-am