耳蜗谷氨酸兴奋性毒性及谷氨酸谷氨酰胺循环机制的研究-耳鼻咽喉科专业论文.docxVIP

军医进修学院硕士论文 军医进修学院硕士论文 缩略词表 NIHL noise_induced hearing loss 噪声性听力损失 CM cochlear micmDhonics 耳蜗微音电位 CAP compoulld action potential 听神经复合动作电位 Glu ￡lutamate 谷氨酸 G1n glutamine 谷氨酰胺 ABR auditorv bminstem resDonse 听性脑干反应 DPOAE distortion Droduct otoacoustic畸变产物耳声发射 emission IHC(s1 innerhair cellfsl 内毛细胞 OHCfs) outerhair cellfs、 外毛细胞 GLAST 91utamate-aspanate trallsporter 谷氨酸-天冬氨酸转运体 GS glutamine svr曲etase 谷氨酰胺合成酶 PAG phosphate-activated glut锄inase 磷酸激活的谷氨酰胺酶 NMDA N．metllvl一D．asDanate N．甲基．D．天冬氨酸 AMPA alpha．amino．3_hydroxy一5-methyl-4一i Ⅱ-氨基一3-羟基·5-甲基一4一 soxaz01epmpionate 异嗯唑丙酸 KA kainate 海人藻酸 HPLC hi曲 perfornlance 1iquid高效液相色谱法 chmmatography AN auditory neuropamy 听神经病 APL anificial perilymph 人工外淋巴液 巳盥Q兰 !：!：ii堕堡19旦啦兰型i望!：!：j：ii!些 !：!：三塑茎堕嘿堕：!：!：三墅 军医进修学院硕士论文 军医进修学院硕士论文 耳蜗谷氨酸兴奋性毒性及谷氨酸一谷氨酰胺循环机制的研究 摘要 摘 要 谷氨酸作为耳蜗中主要的兴奋性传入神经递质，由内毛细胞释放至内毛 细胞与I型螺旋神经形成的突触间隙，过度释放的谷氨酸堆积在突触间隙可 以产生兴奋性毒性，引起突触后渗透压失衡、ca2+超载等一系列功能和形态 学的改变。有报告在噪声暴露时，内毛细胞及传入神经纤维的损伤与灌流谷 氮酸受体激动剂所致的耳蜗病理变化相类似，因此推测噪声引起的耳蜗病理 改变与传入神经递质谷氨酸在耳蜗中的堆积有关。同时耳蜗中存在强有力的 谷氨酸摄取系统——谷氨酸一谷氨酰胺循环。谷氮酸由内毛细胞释放到突触 州隙中，被支持细胞膜上的谷氨酸一天冬氨酸转运体转运进入支持细胞，在 谷氨酰胺合成酶作用下转变为谷氨酰胺并被释放到细胞外。内毛细胞摄取谷 氨酰胺，在磷酸激活的谷氨酰胺酶作用下又重新形成谷氨酸，完成循环。因 此这一循环机制中的谷氨酰胺合成酶在保护噪声引起的听力损失中起着重要 的作用。本研究分为i个部分。 、探讨全耳蜗灌流不同浓度的谷氨酸对耳蜗电位的影响；谷氨酸对有 重要临床意义的DPOAE、ABR的影响和其所引起的耳蜗形态学的改变。杂 色豚鼠50只，随机分为5组，每组10只：(1)人工外淋巴液组；(2)1mmol几 谷氨酸组：(3)10mmol／L谷氨酸组；(4)20mm01／L谷氨酸组；以上4组监测灌 流前、后cM和cAP。(5)10mmol／L谷氨酸组，监测灌流前、后DPOAE和 ABR，并用透射电镜观察耳蜗形态学的变化。用stata4．0统计软件进行统计 分析。组问比较CAP的闽移用单因素方差分析，组内比较DPOAE的变化用 秩和检验，组内比较ABR的变化用配对t检验。结果显示：(1)耳蜗灌流不同 浓度的谷氨酸后cM幅度虽有下降、但是其输入，输出函数曲线仍保持非线性 特点，同时cAP阈值明显升高；并且随着谷氨酸浓度的增加cM幅度愈低、 CAP闽值愈高。(2)灌流谷氨酸对DPOAE的幅度没有影响；但是可以导致ABR 潜伏期延长、幅度下降，甚至无法引出；形态学结果显示内毛细胞及其下方 2 军医进修学院硕士论文 军医进修学院硕士论文 耳蜗谷氨酸兴奋性毒性及谷氨酸一谷氨酰胺循环机制的研究 摘要 传入神经纤维空泡形成，外毛细胞无改变。结果表明：外源性谷氨酸选择性 作用于耳蜗内毛细胞及传入神经系统，引起相应的功能和形态学的改变，并 且谷氨酸浓度与耳蜗功能之间存在量效关系；外源性谷氨酸行全耳蜗灌流可 以建立听神经病的动物模型。 二、探讨噪声暴露后耳蜗外淋巴液中谷氨酸的含量以及噪声暴露对耳蜗 功能和形态学的影响。选用健康杂色豚鼠10只，以右耳为噪声暴露耳；以左 耳为对照耳，在手术显微镜下破坏豚鼠的左耳鼓膜，并用调制好的磷酸锌牙 科水泥堵塞左侧外耳道，建立单侧耳蜗噪声损害的动物模型。采用配对t．检 验比较噪声暴露耳与对照耳外淋巴液中谷氨酸的含量，及噪声暴露耳噪声暴