番茄SlFbf基因的克隆及其对雄蕊发育的影响研究-生物学专业论文.docxVIP

April, 2010 重庆大学硕士学位论文中文摘要 重庆大学硕士学位论文 中文摘要 I I 摘 要 SCF 复合体/26S 蛋白降解途径是生物体内重要的翻译后调控方式，主要参与 激素信号传导、细胞分裂、花发育、花粉识别、胁迫反应等生理过程。F-box 蛋白 是该途径的重要组分之一，其 N 端 F-box 结构域与 SCF 复合体结合，C 端序列决 定着靶蛋白的特异性。 本文在番茄数据库中筛选出与花及果实发育相关的 F-box 家族新基因 SlFbf， 并通过 PCR 克隆了该基因，研究了 SlFbf 在番茄中的表达模式、激素调控及其对 花发育及受精作用的影响。研究结果对揭示该基因的功能及参与的途径具有重要 意义。主要研究结果如下： 1、通过生物信息学方法对 SlFbf 结构及表达模式进行预测，主要有以下特点： 1）具有完整的 ORF，编码 381 个氨基酸，其 N 端具有 F-box 保守域，C 端具有 FBA_1 结构域；2）该基因在番茄基因组序列中无内含子；3）该基因在番茄的叶、 果实及愈伤组织中均有表达；4）预测其启动子序列中含有 GA、ABA 及大量的光 响应元件。 2、SlFbf 的表达模式分析表明，根中表达很弱，茎、叶、花蕾中温和表达，开 花当天的花中丰度最强，在青果中表达较弱，随着果实成熟，在黄果和红果中逐 渐温和表达；在开花当天的雄蕊中的积累量远高于其他发育时期（-2 dpa, 4 dpa and 8dpa）子房、花瓣和萼片；SlFbf 在番茄不同组织的差异表达表明，SlFbf 对番茄雄 蕊发育以及果实成熟过程可能具有重要的调控作用。 3、通过外源激素处理幼苗发现，赤霉素处理诱导 SlFbf 上调表达，脱落酸处 理则诱导 SlFbf 下调表达，而 SlFbf 对生长素及乙烯处理无明显应答反应。结果表 明，SlFbf 可能受到 GA、ABA 信号调控。 4、通过不同光照时间处理番茄幼苗，发现 SlFbf 对短时光照有强烈的应答， 表达量急剧上调，随光照时间的延长迅速下降并保持较低水平，表明该基因对低 光量产生应答反应，可能参与番茄光形态建成。 5、抑制 SlFbf 基因导致番茄花粉体积变大，数量减少，且结籽量大大降低， 揭示 SlFbf 基因对番茄花粉发育及受精过程具有重要的调控作用。 关键词：F-box，克隆，遗传转化，雄蕊，番茄 重庆大学硕士学位论文英文摘要 重庆大学硕士学位论文 英文摘要 II II ABSTRACT SCF coplex/26S proteasome pathway is a major mechanism underlying many organismal processes, such as hormone signal transduction, cell division, flower development, stamen recognition and stress response. As is one of components of SCF complex involved in ubiquitin proteasome system, F-box protein combines with SCF complex through F-box domain in N termini, and determines target proteins with different motifs in C termini. This study separates a novel F-box gene of tomato, named SlFbf, involved in stamen and fruit development. We analyze expression mode of SlFbf and hormonal signaling SlFbf probably involved in, additionally reveal functions of SlFbf with transgenic method. The main conclusions are as follows: We analyzed construction features and expression mode of SlFbf through prediction tools of bioinformatics. There are four characters about SlFbf: firstly, SlFbf contains complete ORF coding 381 amino acids with F-box motif in N termini and F