MALBAC白金微量RNA扩增试剂盒-亿康基因.PDFVIP

MALBAC® 白金微量RNA 扩增试剂盒 【产品编号】 KT110700724/KT110700796 【产品名称】 通用名：MALBAC® 白金微量RNA 扩增试剂盒 英文名：MALBAC® Platinum Single Cell RNA Amplification Kit 【包装规格】 24 测试/盒，96 测试/盒 【产品描述】 MALBAC® 白金微量RNA 扩增试剂盒能在5-6 小时内, 由1-2000 个细胞或10 pg-20 ng 经提取的真核生物总 RNA 为起始，特异性针对其中的mRNA 进行逆转录，并以MALBAC® Template-switching 专利技术在cDNA 的 3’端添加一段带有表达定量分子标签的接头序列，通过该接头序列进行后续的PCR 扩增，获得全长cDNA 扩 增产物，有效避免了cDNA 合成过程中的3’偏好性和基因组DNA 与rRNA 的污染，同时表达定量分子标签可 辅助基因表达量计算，在完整扩增mRNA 序列信息的同时保留链来源信息，对基因表达进行精确定量。一 般情况下，一个反应视投入量可以扩增出2-50 ng 高质量全长双链cDNA。 本试剂盒可获得95%以上的逆转录与扩增成功率，全长cDNA 扩增产物可无缝衔接主流测序平台，如Illumina、 Ion torrent、PGM、Ion Proton 测序仪，下机数据 （2.5M Reads）可检测到90%以上的基因表达，基因表达一 致性超过90%，扩增无明显偏倚，且需要的样本投入量更少。 【预期用途】 本产品主要用于单细胞RNA-Seq 前的样本扩增。单细胞RNA-Seq 是指通过对单个细胞的mRNA 进行逆转录 和PCR 扩增，使用高通量测序手段，对单细胞中mRNA 进行基因表达定量、功能富集、代谢通路等分析。 本产品可以解决传统RNA 逆转录与扩增技术在早期胚胎发育、干细胞、癌症、免疫等研究领域中存在的样 品量极低或细胞异质性的问题，是在单细胞水平研究基因表达强有力的工具，极大地拓展了RNA-Seq 的应 用范围：  极微量样品的表达分析 （单个细胞）  胚胎早期发育研究  肿瘤细胞异质性研究  免疫细胞群研究  干细胞分化研究 【产品原理】 本产品可实现高效且均一的全长转录本扩增。单细胞 （或极微量细胞）经热裂解后释放总RNA，在逆转录 酶的作用下对其中mRNA 进行逆转录并获得cDNA 第一链，而后以MALBAC® Template-switching 专利技术在 cDNA 的3’端添加一段接头序列，并进行Template-switching，而后以接头区段为引物锚定位点进行指数扩增， 以获得符合下游分析或文库构建要求的高质量全长cDNA。其核心技术为专利的MALBAC® Template-switching 技术，可在完整扩增mRNA 全长序列信息的同时保留链来源信息，同时对表达量进行精确定量 （打断方法 构建文库），为RNA-Seq 下游实验或分析提供充足的材料。 【主要组成成分】 1 / 6 KT110700624 KT110700696 组分 标签名 （ 反应） （ 反应） 24 96 细胞裂解液 Cell Lysis Buffer 管 管 管 管 36 μL/ ×1 144 μL/ ×1 逆转录缓冲液 RT Buffer 管 管 管 管 319.2 μL/ ×1 1276.8 μL/ ×1 逆转录酶混合液 RT Enzyme Mix 管 管 管 管