《海洋细菌右旋糖苷酶的纯化及性质研究》-毕业论文（设计）.doc

毕业设计（论文）开题报告 理工类 题 目: 海洋细菌右旋糖苷酶 的纯化及性质 学 院： 海洋学院 专业班级： 生物技术 生技081 学生姓名： 学 号： 510859111 指导教师： （教授） 2012年06月02日 淮海工学院毕业设计（论文）开题报告 1.课题研究的意义，国内外研究现状、水平和发展趋势 （1）课题研究的意义： 右旋糖苷酶(dextranase ，α- D -1,6-glucan 6- D -glucanohydrolase ，EC 1)是专一性地裂解右旋糖苷(dextean) 分子中的α-1,6- 葡萄糖糖苷键的水解酶。 研究发现右旋糖酐与牙斑的形成有很大关系, 葡聚糖酶能够分解水溶性多糖的右旋糖酐酶（dextranase ，Dex），Dex主要切断α- 1,6糖苷键，以及分解水不溶性多糖的变聚糖酶（mutanase），变聚糖酶主要切断α- 1,3 糖苷键。除了分解多糖的作用外，右旋糖酐酶还被认为能够改造和修饰葡聚糖，所以，该酶的发现对于生物膜的研究以及龋病的防治具有重大的意义未来可以用于加酶牙膏和加酶漱口水 ;在制糖工业中,可以增加糖的回收率，降低黏度可以增强药物的化学稳定性生物利用度;在HYPERLINK /view/2989.htm啤酒生产糖化过程中，添加该酶对缩短麦汁的过滤时间有明显的效果。分子量70kDa 左右的右旋糖酐是目前公认的优良血浆代用品之一，有增加血容量的作用，临床主要用于治疗失血性休克。工业上通常使用酸水解高分子量右旋糖酐, 以生产低分子量的药用右旋糖酐, 如使用右旋糖酐酶水解法则更加环保、高效有重要的意义。 （2）国内外研究现状、水平和发展趋势： 目前国内外报道的产生右旋糖苷酶微生物主要为青霉( Penicillium sp.)、对角毛壳菌( Chaetomium gracile)、链球菌( Streptococcus sp.)、斯达油脂酵母 ( Lipomyces starkeyi)、曲霉( Aspergillus ustus)、芽孢杆菌( Bacillus sp.)能够产右旋糖苷酶。而海洋微生物产右旋糖苷酶的研究在国内外只有连云港淮海工学院海洋学院吕明生教授和王淑军教授的论文一株产低温右旋糖苷酶海洋细菌的筛选和鉴定有相关的报道，而国内外其它期刊均很少有相关报道。 所以说目前国内外对于海洋細菌产右旋糖苷酶研究还出去起步状态。但是发展前景是美好的，目前发现的产右旋糖苷酶的菌大部分都是真菌，不光对于右旋糖苷酶的提取技术要求高，而且资源少。目前右旋糖苷酶主要从人的口腔、陆地及温泉的微生物中分离, 大部分右旋糖苷酶为中温酶, 最适温度大多为50 ℃左右。低温酶主要来源于低温生态环境如海水、海底沉积物、冰川、高山、南北极的低温微生物产生, 随着陆地资源的不断开发而面临枯竭, 近年来人们逐渐将海洋微生物作为获得低而产右旋糖苷酶海洋细菌的发现温蛋白酶的新来源。该 右旋糖酐酶产生菌目前国内报道不多，并对其产生的右旋糖酐酶进行了分离纯化及酶学性质研究，为其应用于工业生产药用级右旋糖酐打下基础。 淮海工学院毕业设计（论文）开题报告 2.课题的基本内容，可能遇到的困难，提出解决问题的方法和措施 论文研究内容： 2.1 海洋细菌右旋糖苷酶的纯化 应用超滤 （2）乙醇沉淀 （3）硫酸铵盐析 （4）离子交换层析 2.2 海洋细菌右旋糖苷酶的性质研究 （1）酶的最适催化温度研究 （2）酶的最适催化pH研究 （3）酶的热稳定性研究 （4）酶的pH稳定性研究 可能遇到的困难，提出解决问题的方法和措施： 操作方法不熟练，实验数据的精准度，可能导致结果不理想，需重复进行，直至结果符合要求。实验过程中多向师兄请教，虚心向他人学习，多向老师汇报. 3.课题拟采用的研究手段（途径）和可行性分析 研究手段： 通过对DP03海洋细菌的培养得到粗酶，应用超滤、乙醇沉淀、硫酸铵盐析、离子交换层析一系列步骤得到纯化的右旋糖苷酶。并对该右旋糖苷酶进行性质研究。 可行性分析： 本课题所需的仪器设备、场地都可以满足要求，部分药品和有关材料可以从教师科研经费解决，对文献资料的检索现有图书馆基本能够满足。  毕业设计(论文)外文资料翻译 学 院： 海洋学院 专业班级： 生物技术 生技081 学生姓名：