向日葵染色体C分带及其荧光原位杂交分析.doc

- -- 摘 要 本研究以内葵杂 3 号三交种为材料，在已有的核型分析基础上，利用 Giemsa C- 分带技术建立了染色体 C-带带型；采用同源序列法克隆了 5SrDNA、18SrDNA 基因 片段并进行了序列测定；利用荧光原位杂交（FISH）技术，将 5SrDNA、18SrDNA 和 45SrDNA 定位在染色体上。本研究为向日葵染色体识别及种间亲缘关系和染色体 进化行为的研究提供了新的特异性分子标记。主要研究内容及结果如下： 利用 HKG(HCl-KOH-Giemsa) C-分带法对内葵杂 3 号三交种染色体进行了 C- 带分析，结果表明：染色体组共有 62 条带纹，以中间带和着丝点带为主；带纹强弱 差异明显，其中 46 条为强带，16 条为弱带；每条染色体都表现出明显 的带纹特征，带型公式为： 2n=2x=34=8I++3T++5I+I+T++4C+2CI+4CI++3CI++I+T++CT++2CT+。C-带揭示了染色体 上的异染色质区域。 以内葵杂 3 号三交种基因组 DNA 为模板，通过 PCR 的方法扩增了 18SrDNA 和 5SrDNA 部分片段，将扩增片段克隆到 pGEM-T-easy 上，测得片段长度分别为 1808bp 和 515bp。经 BLAST 分析，1808bp 序列与 GeneBank 中公布的向日葵 18SrRNA 基因序列同源性达 99