槲皮素对铁和酒精联合诱导的肝细胞氧化损伤与铁代谢相关基因表达的影响.doc

· ··· 华中 科 技 大 学硕士 学 位论文 槲皮素对铁与酒精联合诱导的肝细胞氧化损伤及铁代谢相关基 因表达的影响 研究生：邓玥 导师： 姚平副教授 摘 要 第一部分 槲皮素对铁与酒精联合诱导的肝细胞氧化损伤 及 LIP-Fe 的影响 目的：以乙醇孵育的大鼠原代肝细胞为研究模型，通过酶学与生化分析，系统观 察槲皮素干预后乙醇代谢与铁应激状态下肝细胞氧化损伤相关指标及可变铁池（Lible iron pool，LIP-Fe）的变化，探讨槲皮素的潜在保护效应。 方法： 1、采用两步胶原酶灌流技术分离培养大鼠原代肝细胞，经不同剂量的外源性铁 剂次氮基三醋酸铁胺（Fe-NTA，5~100 μ mol/L）处理24 h，检测细胞培养上清液中乳 酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）与谷草转氨酶（aspartate transaminase，AST） 活性、细胞超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）与谷胱甘肽（glutathione， GSH）水平、活性氧（reactive oxygen species，ROS）及丙二醛（malondialdehyde， MDA）水平，以观察不同浓度Fe-NTA 染毒后肝细胞氧化损伤程度变化，选择Fe-NTA 适宜的染毒剂量。 2、根据上述研究确定的 Fe-NTA 染毒剂量（50 μ mol/L）对乙醇（