《沉析》-精选·课件设计.pptVIP

1.2 应用实例-银耳多糖的提取纯化 加3倍量95％乙醇 摇匀 3.多糖的沉淀（乙醇沉析 ） 抽滤液 离心 （3000r/min） 15min 沉淀 用无水 乙醇洗 2次 乙醚 洗涤 1次 50℃ 以下 真空 干燥 3、等电点沉淀法应用 在生化产品的分离纯化过程中，常利用两性物质如氨基酸、蛋白质、多肽、酶、核酸等具有不同的等电点的特性来进行产品的分离纯化。 由于许多蛋白质的等电点十分接近，而且带有水膜的蛋白质等生物大分子仍有一定的溶解度，不能完全沉淀析出，因此，单独使用此法分辨率较低，因而此法常与盐析法、有机溶剂沉淀法或其他沉淀剂一起配合使用，以提高沉淀能力和分离效果。 1.3 应用实例-等电点沉淀法分离牛乳中的酪蛋白 材料 鲜牛奶 醋酸钠、优级纯醋酸、95%乙醇、乙醚、蒸馏水、0.2mol/L pH 4.7醋酸-醋酸钠缓冲液 等电点沉淀法分离牛乳中的酪蛋白 将鲜牛奶30 mL及醋酸-醋酸钠缓冲液30 mL分别水浴加热40℃左右，并用8层纱布过滤牛奶 量取加热后的牛奶20ml，在搅拌下慢慢加入加热后的醋酸-醋酸钠缓冲液20ml，用酸度计调pH至4.7 将上述混合液冷至室温，离心（3500 r/min）15min，弃去上清液，得酪蛋白粗制品 用缓冲液洗沉淀3次，离心（3500 r/min）10min，弃去上清液 1.3 应用实例-等电点沉淀法分离牛乳中