152_GLP-1受体激动的高通量筛选及作用机制研究.docVIP

GLP-1受体激动的高通量筛选及作用机制研究 殷菲，郑旭煦，景佳佳，肖何，刘建辉* (重庆工商大学药物化学与化学生物学研究中心，重庆，400067) *, 刘建辉，男，副教授，硕士研究生导师 Tel/Fax：023 eamil: HYPERLINK mailto:jhliu@ctbu.edu.cn jhliu@ctbu.edu.cn 摘要：目的 筛选GLP-1受体激动剂，并进行初步的作用机制研究。方法 建立稳定的GLP-1受体激动剂高通量筛选模型，从天然药物中筛选活性成分；在PC12细胞中验证GLP-1受体激动剂的功能及作用机制。结果 经过筛选、鉴定，京尼平苷是一种新的GLP-1受体激动剂，能够通过MAPK信号通路诱导PC12细胞分化，对抗过氧化氢诱导的PC12细胞氧化损伤，提高神经细胞活力。结论 京尼平苷具有与GLP-1受体激动剂类似的神经营养和神经保护功能。 关键词：胰高血糖素样肽1(GLP-1)；激动剂；京尼平苷 Screening of Agonist for Glucagon-Like Peptide-1 Receptor and its Effect in PC12 cells Yin Fei, Zheng Xuxu, Jing Jiajia, Xiao He, Liu Jianhui (Research Center of Pharmaceutical Chemistry Chemical Biology, Chongqing Technology and Business University, Chongqing, 400067, China) ABSTRACT：OBJECTIVE To acquire the agonist for glucagon-like peptide-1 receptor, and check its function. METHODS Natural products are collected to screen in the stable cell line of GLP-1 receptor, and the active component was identified in the PC12 cells. RESULTS Geniposide is a novel agonist for GLP-1 receptor, which induces the neuronal differentiation of PC12 cells via mitogen-activated protein kinase pathway, and prevents PC12 cells from oxidative damage induced by hydrogen peroxide. CONCLUSION Geniposide has the similar function with the agonist for GLP-1 receptor, including neurotrophic and neuroprotective effects. KEY WORDS：Glucagon-like peptide-1; Agonist; Geniposide 1 前言 随着人类平均寿命的增长，人口老龄化问题日益突出，Alzheimer病(Alzheimers disease，AD)的发病率越来越高。尽管人们目前对AD产生的原因和发病机制还不十分清楚，但是，氧化应激以及细胞抗氧化功能的失衡在AD的发病机制中有重要的作用[1-2]；环境或基因突变导致淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein，βAPP)代谢异常，在神经元细胞外产生具有兴奋毒性的β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein，Aβ)是形成AD的重要机制之一[3]。因此，筛选和发现一些能够对抗氧化应激、提高细胞抗氧化能力的药物对于治疗和预防AD具有重要意义。 Perry等研究发现，胰高血糖素样肽1(glucagon like peptide-1，GLP-1)及其受体激动剂exendin-4具有神经营养和神经保护作用，能够诱导PC12细胞分化、对抗多种因素引起的神经元氧化损伤[4-9]。我们应用以Luciferase为报告基因的GLP-1受体激动剂高通量筛选(high throughput screen)模型，发现传统中药栀子提取物中存在GLP-1受体激动剂，经过初步分离和与标准品对照证实，京尼平苷(geniposide)能够激活GLP-1受体。在此基础上，我们进一步在大鼠嗜铬神经瘤PC12细胞中研究发现，京尼平苷不仅能够通过激活有丝分裂原激活的蛋白激酶(