酵母细胞的固定化x)..pptVIP

温故知新： 1、洗衣粉中添加________，可以更有效地清除顽渍。常用的酶制剂有_________________四类。 2、影响酶活性的因素有_______、 ________和_________。 课题3 酵母细胞的固定化 课题目标 1、说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理 2、尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵 阅读P49独立思考： 1、解决酶应用中存在问题的方法是？优点？ 2、什么是高果糖浆？使用它有何好处？ 3、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？ 4、介绍反应柱及其优点？ （一）固定化酶的应用实例 一、基础知识 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办? 有。一种酶只能催化一种或一类化学反应，而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行，所以操作比较麻烦。 可采用固定化细胞技术 1、概念：利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术。 包埋法 化学 结合法 物理吸附法 （二）固定化酶技术和固定化细胞技术 固定化酶 或者固定化细胞分别适用哪些方法？原因？ 适用于 固定化酶 适用于 固定化细胞 包埋法是指将微生物的细胞均匀包埋在不溶于水的多孔性载体中 化学结合法是指将酶分子或细胞相互结合或将其结合 到载体上 物理吸附法是指将酶吸附到固体吸附剂的表面 1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化细胞技术哪一种方法更容易？ 哪一种方法对酶活性的影响更小？ 2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？ 3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应该选择哪种方法？ 固定化细胞 固定化细胞固定的是一系列酶 固定化细胞技术 固定化细胞 (阅读P50，思考回答) 练习： 1.使用固定化细胞的优点是( )。 A.能催化大分子物质的水解 　 B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近 　 D.有利于酶在细胞外发挥作用 B 2、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（ ） A、温度 B、PH C、水分 D、营养 D 3. 关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。 A．既能与反应物接触，又能与反应 物分离 B．固定在载体上的酶可被反复利用 C．可催化一系列反应 D．酶的活性和稳定性受到限制 C 二、实验操作——酵母细胞的固定化 包埋法常用哪些载体？ 明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等 其共同的特点是不溶于水的多孔性载体 二、实验操作 （一）制备固定化酵母细胞 观看视频思考下列问题： （1）制备过程包括哪几个步骤？ （2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？ （3）各步骤应当分别注意什么问题？ 二、实验操作——酵母细胞的固定化 （1）酵母细胞的活化： 〖思考1〗活化是指什么？方法？ 〖思考2〗在活化酵母的过程中要注意？ 酵母细胞活化时体积会变大， 所用容器要大一些，防止活化液溢出； 1、步骤： 二、实验操作——酵母细胞的固定化 （1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液： 1、步骤： （1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液： （3）配制海藻酸钠溶液： 是最重要的环节： 如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠； 如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。 注意事项： 加热时要用小火， 或者间断加热（目的？） （浓度要适宜？） 二、实验操作——酵母细胞的固定化 1、步骤： 二、实验操作——酵母细胞的固定化 （1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液： （3）配制海藻酸钠溶液： （4）海藻酸钠溶液与 酵母细胞的混合： 必须将溶化的海藻酸钠溶液冷却至室温才能与酵母细胞进行混合。 为什么？搅拌的目的？ 1、步骤： 二、实验操作——酵母细胞的固定化 （1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液： （3）配制海藻酸钠溶液： （4）海藻酸钠溶液与 酵母细胞的混合： （5）固定化酵母细胞： CaCl2溶液的作用？ 所形成的凝胶珠在CaCl2溶液中浸泡的目的？ 形成稳定的结构 1、步骤： 使胶体聚沉。 2、如何判断固定化酵母细胞是否成功？ 观察凝胶珠的颜色和形状 （1）若凝胶珠颜色过浅，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少 （2）凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试 检验凝胶珠的质量是否合格，可