酵母细胞的固定化..pptVIP

* 思考：什么是酶制剂？酶制剂有哪些种类？ 含有酶的制品 ①定义： 多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶 ②种类： A、液体酶制剂： 治疗某些胃病的胃蛋白酶液 B、固体酶制剂： 【复习】加酶洗衣粉：含有酶制剂的洗衣粉。 ③酶的生产： 提取法、发酵法、化学合成法 ④酶的提取和分离纯化： 提取出来的酶还要经过分离、纯化，再加入适量的稳定剂和填充剂，制成相应的酶制剂后才能用于催化化学反应。 ⑤酶制剂特点： 通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件敏感，容易失活 溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本 反应后酶会混在产物中，影响产品质量，难以在生产中广泛应用 （一）课题背景 1、直接使用酶的优点： 缺点： ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活 ②溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本 ③反应后，酶会混在产物中，影响产品质量，难以在工业生产中广泛应用 设想： 能否有一种方法使酶发挥它的优点，而没有这些缺点呢？ （一）课题背景 1、直接使用酶 2、固定化酶的优点： 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用。 缺点： 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的。 设想： 能否将合成一系列的酶的细胞直接固定呢？ （一）课题背景 1、直接使用酶 2、固定化酶 3、固定化细胞的优点： 固定化细胞制备的成本更低，操作更容易。 固定后的酶或细胞与反应物不容易接近，可能导致反应效果下降由于大分子物质难以自由通过细胞膜，因此固定化细胞的应用也受到限制 成本低、操作容易、对酶活性的影响更小、可以催化一系列的反应、容易回收 固定化细胞 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用 固定化酶 对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量 催化效率高，低耗能、低污染等 直接使用酶 不足 优点 小结：直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点 （二）固定化酶的应用实例 高果糖浆是 。 果糖含量为42%的糖浆 葡萄糖异构酶 能将葡萄糖转化为果糖的酶是 。 使用固定化酶技术，将酶固定在一种 上再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着许多小孔的 。酶颗粒无法通过筛板的小孔，而反应溶液却可以自由出入。生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与 接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。 颗粒状载体 筛板 葡萄糖异构酶 反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量 生产优点： 物理吸附法 化学结合法 包埋法 适合固定酶 适合固定细胞 （三）固定化酶或细胞的技术 原因：体积大的细胞难以被吸附或结合 原因：体积小的酶容易从包埋的材料中漏出 二、实验操作 方法： 包埋法固定化细胞，即：用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞。 （一）制备固定化酵母细胞 操作步骤： 实验材料： 干酵母、CaCl2、海藻酸钠 等 1、酵母细胞的活化 ① 过程 称取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml。用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右，使其活化 ②注意事项 A、活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。 B、活化时要选择足够大的容器：因为酵母细胞活化时体积会变大，防止酵母细胞活化液溢出容器外。 2、配置物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液 ① 过程 称取无水CaCl2 0.83g，放入200ml的烧杯中，加入150ml的蒸馏水，使其充分溶解，待用 ②注意事项 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防自来水中各种离子影响实验结果。 3、配制海藻酸钠溶液 称取0.7g海藻酸钠，放入50ml小烧杯中，加入10ml水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10ml ① 过程 ②注意事项 加热时要用( )，或者( )，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止。 小火 间断加热 【思考6】