实验三_叶绿体色素的提取分离和性质分析.pptVIP

二、实验原理 2.类胡萝卜素 （三）叶绿素的光学性质 三、实验材料与试剂 新鲜的菠菜叶片。 95%乙醇 、CaCO3、醋酸铜结晶、浓盐酸、汽油。 量筒，滤纸，大培养皿一只，小培养皿一只，长滴管，剪刀。 四、实验步骤 3、叶绿体色素吸收光谱曲线 取1ml提取液于比色杯中（试管2），加3ml95%乙醇。 用95%乙醇作为对照，在400~700nm之间每隔20nm测一次光。 记录波长和吸光度A于下表中，并在标准绘图纸上绘出叶绿体色素的吸收光谱曲线。 4、叶绿体色素含量的计算 在标准曲线上查出波长600nm时的叶绿体色素浓度。 叶绿体色素含量（mg·g-1）= 6、光对叶绿素的破坏作用 将试管4置于暗处，试管3置于强光下，照射2~3小时后，观察试管颜色的变化，解释这种现象。 * * （一）叶绿体色素： 胡萝卜素 叶黄素 叶绿素a 叶绿素b 1.叶绿素 叶绿素与类胡萝卜素都具有光学活性，表现出一定的吸收光谱，可用分光光度计精确测定。 1、 叶绿体色素提取： 将菠菜叶片擦净，去中脉后取 10g剪碎，加少许碳酸钙和石英砂，再分次加入10mL酒精研磨，过滤，定容至50ml，分装于5个试管内，容量分别为10ml。 2 3 4 5 1 A 700 680 660 640 620 600 …... 500 480 460 440 420 400 λ （nm） 样品鲜重（g） 叶绿体色素浓度（mg·L-1）×提取液体积（mL）×10-3 5、叶绿素提取液荧光现象观察 取试管3： 从与入射光垂直的方向观察； 再在透射光方向观察叶绿体色素溶液的颜色； 记录叶绿素体色素溶液颜色有何不同 ，分析原因。