柱前衍生化HPLC分析蒲公英多糖的单糖组成.pdf

柱前衍生化 HPLC 分析蒲公英多糖的单糖组成 高金波，孙丽娜(佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007) 摘要：目的 合理优化衍生方法测定蒲公英多糖中单糖的组成及摩尔比。方法 采用 1-苯基-3- 甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱 前衍生，用反相高效液相色谱法进行测定。色谱条件为：ZORBAX-C18 柱；流动相：0.1 mol·L1 的磷酸盐缓冲液(pH 6.7)- 1 乙腈(83 ∶17)；流速：1 mL·min ；检测波长：245 nm ；进样量：20 μL ；柱温：室温。结果 蒲公英多糖由 D- 鼠李糖、 葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和 D- 阿拉伯糖组成，以不同方法提取的各单糖含量的摩尔比为：水提取法，Rha ∶Glc ∶Gal ∶ Ara=0.088 ∶0.500 ∶0.190 ∶0.340 ；超声提取法，Rha ∶Glc ∶Gal ∶Ara=0.050 ∶0.350 ∶0.080 ∶0.320 ；酶提取法，Rha ∶Glc ∶ Gal ∶Ara=0.270 ∶0.630 ∶0.330 ∶0.460 ；超声协提取同酶法，Rha ∶Glc ∶Gal ∶Ara =0.078 ∶0.550 ∶0.130 ∶0.170 。结论 改 进后的衍生化方法和等度洗脱的色谱方法具有操作简单、快速、重复性好等特点，可用于蒲公英多糖中单糖组成和摩尔 比的测定。 关键词：柱前衍生化；高效液相色谱法；单糖； 1-苯基-3- 甲基-5-吡唑啉酮 中图分类号：R917.10 ；R917.791 文献标志码：B 文章编号：1007-7693(2010)01-0053-04 基金项目：黑龙江省卫生厅科研课题(2007-510) 作者简介：高金波，女，教授 Tel: (0454)6557559 E-mail: gaojinbo2001@163.com 中国现代应用药学2010 年 1 月第 27 卷第 1 期 Chin JMAP, 2010 January, Vol.27 No.1 ·53 · Analysis on Monosaccharide Composition of Taraxacum Polysaccharides by Pre-column Derivatization HPLC GAO Jinbo, SUN Lina(College of Chemistry and Pharmacy of Jiamusi University, Jiamusi 154007, China) ABSTRACT: OBJECTIVE To optimize the derivative method reasonably and detect monosaccharide components and molar ratio of taraxacum polysaccharides. METHODS Pre-column derivative reagent was 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone(PMP), monosaccharide composition and molar ratio of taraxacum polysaccharides were detected by reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC). Chromatographic conditions: ZORBAX-C18 column; mobile phase: 0.1 mol·L1 phosphate buffer solution (pH 6.7)-acetonitrile (83 ∶17); velocity: 1 mL·min1; detection wavelength: 245 nm; injection volume: 20 μL; column temperature: room temperature. RESULTS Taraxacum polysaccharides was composed of D-rhamnose, g