当归黄芪半仿生提取物对大鼠腹部术后胃肠运动功能障碍的影响-中药学专业论文.docxVIP

当归黄芪半仿生提取物对大鼠腹部术后胃肠运动功能障碍的影响 当归黄芪半仿生提取物对大鼠腹部术后胃肠运动功能障碍的影响 PAGE PAGE 1 摘 要 目的 研究当归黄芪的半仿生提取方法，观察当归黄芪半仿生提取物(SEA)对腹部术后 大鼠胃肠运动功能障碍的影响，并探讨其作用机制。 方法 采用均匀设计，基于补血作用和补气作用筛选 SEA 的最佳提取工艺；SD 大鼠 禁食不禁水 24h 后，水合氯醛溶液麻醉，开腹，盲肠下 2cm 处结肠肠管做 2 处 2mm 的横向切口，切口行原位缝合，随后缝合腹膜、肌层及大鼠皮肤，建立腹部手术模 型。术后 24h，将大鼠随机分为手术模型组、阳性对照组、当归黄芪水提物(AEA) 对照组、SEA 高、中、低剂量组，并设假手术组为对照，假手术组及手术模型组按 10mL/kg 灌胃生理盐水，阳性对照组灌胃西沙比利（3.5 mg/kg），AEA 对照组灌胃 AEA 溶液（生药 5.2g/kg），SEA 高、中、低剂量组分别灌胃 SEA 溶液（生药 10.5、 5.2、2.6g/kg），术后第 24h 开始给药，连续 10d。观察各组大鼠的一般状态，并于术 后第 3d 给药 2h 后，记录首次排便时间和 6h 内的粪便重量；测定大鼠摄食量和胃肠 推进指数；ELISA 法测定血浆胃动素（MTL）和血清胃泌素（GAS）水平；结肠组 织 H-E 染色，光镜下观察组织形态；透射电镜观察结肠 Cajal 间质细胞（ICC）超 微结构；免疫组化检测肌球蛋白轻链激酶（MLCK）、肌动蛋白和肌球蛋白含量。 结果 1）初步确定 SEA 的最佳提取工艺为第 1 次提取人工胃液用量 8 倍、第 1 次提 取时间 3.0h、第 2 次提取人工肠液用量 7 倍、第 2 次提取时间 4.0h。 2）术后，模型大鼠精神萎靡，活动迟缓，排便量少、体重减轻等现象；给药第 9d，血浆 MTL 和血清 GAS 含量均降低，结肠平滑肌细胞间隙变大，排列不齐，胞 浆减少、空泡样改变显著，血管显著扩张，平滑肌变薄，纤维化改变、肠炎性肉芽、 脂肪粒较多，ICC 的超微结构出现明显损伤，MLCK、肌动蛋白和肌球蛋白含量明 显下降。 与手术模型组比较， SEA 高、中、低剂量组大鼠体重增加，SEA 高、中剂量 组大鼠首次排便时间缩短，6h 内排便量增多，且 24 小时进食量增加；给药第 9d，SEA 高、中剂量组大鼠胃肠推进指数显著增加，血浆 MTL 含量均显著升高，SEA 高剂 量组大鼠血清 GAS 显著升高。SEA 高、中剂量组可以改善结肠病理改变，结肠 ICC 细胞数量明显较多，结构相对完整；结肠 MLCK、肌动蛋白和肌球蛋白含量均有不 同程度的上升。 结论 用半仿生提取技术能获得具有较强药理活性的当归黄芪提取物，SEA 对腹部术 后大鼠胃肠运动功能障碍具有一定的治疗作用，作用机制可能与升高血液 MTL 和 GAS 水平、保护结肠 ICC 细胞、升高结肠 MLCK、肌动蛋白和肌球蛋白含量有关。 关键词：当归黄芪；半仿生提取；腹部手术；胃肠功能障碍 ABSTRACT Objective To study semi bionic extraction technology of Angelica sinensis and Astragalus membranaceus, and to confirm effects of semi bionic extraction of A. sinensis and A. membranaceus (SEA) on gastrointestinal motility dysfunction in abdominal surgery rats, and to explore its mechanisms, the experiment was arranged. Methods By using uniform design, the best extraction process of SEA was found based on pharmacodynamics method of enriching blood and benefiting qi effects of A. sinensis and A. membranaceus. SD rats were fasted for 24h, General anesthesia was operated by chloral hydrate, The abdominal cavity was opened, Two transverse incisions were operated at olon appendix 2cm distance (2cm apa