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氟对大鼠氧化应激及骨组织RUNX2表达的影响-病理学与病理生理学专业论文
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氟对大鼠氧化应激及骨组织 Runx2 表达的影响
专 业:病理学与病理生理学 研究生:梅 梅
导 师:于燕妮教授、郭兵教授
摘 要
目的 探讨转录因子 Runx2 在氟骨症发生过程中的可能作用以及与全身氧化应 激之间的关系。
方法 选择 SD 大鼠 40 只,雌雄各半,随机分为 4 组,每组 10 只;设对照组和 低氟组、中氟组、高氟组(染氟组在饮水中分别加入含氟 25 mg/L、50mg/L、100 mg/L 氟化钠);实验 4 个月。检查氟斑牙发生情况,采用氟离子电极法测定尿氟 含量,采用生化方法检测大鼠肝、肾功能以及血清、肝和肾组织中超氧化物歧化 酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)活性和丙二醛(MDA)含量;逆转录聚合 酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠骨组织 Runx2 mRNA 及蛋白表达水平。
结果 1、染氟大鼠氟斑牙发生率分别为低氟组60%、中氟组70%、高氟组90%; 染氟各组大鼠尿氟含量明显较正常对照组增高(P<0.05);表明慢性氟中毒模型 复制成功。2、与对照组比较,染氟各组大鼠血清、肝和肾组织中MDA含量随染 氟剂量的增高逐渐升高(P<0.05),SOD和GR活性则逐渐下降(P<0.05)。3、 染氟各组大鼠肝、肾功能与正常对照组比较变化不明显(均P>0.05)。4、50mg/L 染氟组大鼠骨组织Runx2 mRNA及蛋白表达水平明显增高(均P<0.05)。5、 Runx2mRNA及其蛋白表达水平与氧化应激各指标相关(P<0.05)。
结论 1、氟中毒大鼠机体内氧化系统与抗氧化系统失衡,发生明显氧化应激;2、 Runx2mRNA 及其蛋白过表达可能参与氟对骨组织的损伤;3、Runx2mRNA 及其 蛋白表达的异常上调可能与体内过量氟蓄积所致的氧化应激有一定关系。
关键词: 氟中毒;氧化应激;Runx2
前 言
氟中毒是指机体长期过量摄取氟化物而引起机体器官和组织的毒性损害,地 方性氟中毒是一种在特定的地理环境中发生的生物地球化学性疾病,机体通过饮 水、空气或食物等介质,摄入过量的氟而导致的全身慢性蓄积性中毒。它主要流 行于中国、 HYPERLINK /view/2174.htm 印度、苏联、 HYPERLINK /view/21934.htm 波兰、捷克斯洛伐克、 HYPERLINK /view/3762.htm 德国、意大利、英国、 HYPERLINK /view/2398.htm 美国、阿 根廷、 HYPERLINK /view/10169.htm 墨西哥、摩洛哥、日本、 HYPERLINK /view/6395.htm 朝鲜、马来西亚等国;在 HYPERLINK /view/61891.htm 我国主要流行于贵州、 HYPERLINK /view/6510.htm 陕西、甘肃、 HYPERLINK /view/6204.htm 山西、山东、 HYPERLINK /view/4675.htm 河北、辽宁、 HYPERLINK /view/2171.htm 吉林、黑龙江等省。贵州是全国最严重 的地方性氟中毒发病地区,全省现有 37 个氟中毒流行县,病区总人口约有 1900 多万人[1]。氟是人体所必需的微量元素之一,是化学性质极活泼的元素,机体吸 收的氟 90%以上储存在骨组织中,氟在牙齿和骨骼的形成以及钙磷代谢等方面具 有重要的作用,但机体长期摄入过量的氟可引起慢性氟中毒,主要表现为以氟斑 牙和氟骨症为主的慢性全身性疾病[2]。根据人体摄氟的不同途径,主要分为饮水 型、燃煤污染型和饮茶型。主要表现为氟斑牙、氟骨症及非骨性器官的代谢功能 紊乱。其中饮水型和燃煤污染型氟中毒在我国分布广,病情重,是一种严重危害 人民身体健康的地方病之一,因此研究其发病机制对地方性氟中毒的防治有着积 极的意义。
地方性氟中毒发病机理的研究一直是国内外学者们关注的课题,其发病机理 目前并未完全阐明清楚。近年来的许多研究表明,过量摄氟可引起机体内自由基 代谢紊乱、脂质过氧化物增加以及抗氧化物减少而影响与自由基代谢有关的酶, 从而造成了对机体组织结构和功能的损伤。由于自由基的反应性强、寿命短,其 半衰期必然就非常的短暂,从而使直接测量这些自由基的水平变得非常困难。但 是自由基与其它分子发生反应后产生的氧化产物,可以作为反映氧自由基水平的 标志物。如氧自由基攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸,引发脂质过氧化作用,生 成的脂质过氧化物如丙二醛(MDA)。所以,通过检测 MDA 的量便可以反映出机体 内脂质过氧化程度,间接地反映细胞损伤的程度。另外,还可以通过检测抗氧化 剂超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH
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