王峰 第6章 酶.ppt

*协同作用 变构酶为多亚基组成，当一个配体（调节物或底物分子）与酶蛋白结合后，可以影响另一配体与酶的结合，亚基之间的这种互相影响，称为协同效应。 同种效应：影响与同一物质（配体）的结合， 异种效应：影响与另一物质（配体）的结合 正协同效应 ——（变构激活） 负协同效应 ——（变构抑制） 影响的方式 影响的效果 四、核酶与抗体酶 研究发现RNA分子具有酶的活性，称为核酶，又称为核糖酶、类酶、酶性RNA。 1、核酶（ribozyme）：具有生物催化活性的RNA。 主要参与RNA的自我剪接过程。 (一)核酶 (ribozyme) 1982年美国T. Cech等人发现四膜虫的rRNA前体能在完全没有蛋白质的情况下进行自我加工，发现RNA有催化活性 Thomas Cech, University of Colorado at Boulder, USA 1983年美国S.Altman等研究RNaseP（由20%蛋白质和80%的RNA组成），发现RNaseP中的RNA可催化E. coli tRNA的前体加工。 Sidney Altman Yale University New Haven, CT, USA Cech和Altman各自独立地发现了RNA的催化活性，并命名这一类酶为ribozyme（核酶），2人共同获1989年诺贝尔化学奖。 3、核酶发现的意义： 〈1〉对研究生命起源和进化有重大意义：核 酶大多在古老生物中发现，或许是现代 生物物种内存在的“活化石”。 〈2〉人工核酶：可用人工合成的核酶连接于 病原体（如RNA病毒）、有害基因（如 癌细胞基因）的RNA或DNA并使其破坏。 （二）抗体酶（Catalysis antibody） 既有酶活性又有抗体活性的模拟酶称为抗体酶 抗体酶催化的反应： 酰基转移反应 水解反应 氨基酸的活化反应 酯水解 酰胺水解 第七节 酶在医药学上的应用 一、酶在疾病诊断上的应用 （一）血清酶测定应用于肝胆疾病 1、转氨酶 2、卵磷脂-胆固醇转酰基酶（LCAT） 3、γ-谷氨酰转肽酶（ γ -GT） （二）血清酶测定应用于急性心肌梗塞的诊断 1、LDH同工酶 2、CK同工酶 （三）血清酶测定应用于诊断肿瘤 1、 γ –GT 2、半乳糖基转移酶（Gal T）同工酶 二、酶在疾病治疗上的应用 1、帮助消化的酶 2、消炎酶 3、治疗冠心病用酶 4、止血酶和抗血栓酶 5、抗肿瘤酶 6、其他酶类药物 胰弹性蛋白酶等 凝血酶及溶栓酶 三、固定化酶及其在医药上的应用 （一）概念——借助于物理和化学的方法把酶束缚在一定空间内并仍具有催化活性的酶制剂称为固定化酶。 （immobilized enzyme） （二）优点 1、稳定性提高 2、可反复使用，提高效率，降低成本 3、有一定机械强度，适合现代规模生产 4、极易和产物分离，可简化产品纯化工艺 （三）固定化酶的制备方法 1、吸附法 2、共价结合法 3、交联法 4、包埋法 R-NH2 R-N=N-E NaNO2，HCl E 如：戊二醛与酶蛋白的交联 物理吸附：高岭土、磷酸钙凝胶 离子吸附：CM-纤维素等载体 （四）固定化酶在医药上的应用 1、药物生产中的应用 2、亲和层析中的应用 3、医疗上的应用：人工肾 活化能是在化学反应中，为了使反应发生必须对反应物增加的能量。解释你的问题，首先需要明白，本身的质量和化学性质在化学反应前后都没有发生改变的催化剂，本身参与了反应没有？事实上，催化剂本身是发生了反应了的。表面表现上“降低”了的活化能，事实上，只是因为底物和催化剂发生的反应，所需要的化学能比较低。而其后，发生的反应生成了催化剂，所需活化能也较低，也就是催化剂一直在发生反应，但是生成了等量的催化剂，只是总体没有发生改变而已。这样也就理解了催化剂“改变”活化能的原因。因为考虑的不是同一个反应。 * * * * 特点： a)抑制剂只与酶－底物复合物结合； 抑制程度取决于抑制剂的浓度及底物的浓度； 动力学特点：Vmax降低，表观Km降低。 抑制剂↑ 1/V 1/[S] 无抑制剂 各种可逆性抑制作用的比较 ? 动力学参数 表观 Km