6.2《基因工程及其应用》+课件+曾燕红.pptVIP

第6章 从杂交育种到基因工程 第2节 基因工程及其应用 以往，治疗糖尿病的胰岛素是从动物胰腺中提取的，从100千克猪、牛等动物的胰腺只能提取3－4克胰岛素，治疗一个患者需宰杀40－50头牛，这种药物的造价就可想而知了。 基因工程概念 基因工程：又叫基因拼接技术或DNA重组技术。就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰和改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向的改变生物的遗传性状。 基因工程操作的工具 将目的基因片断从人体细胞内提取， 需要基因的剪刀——限制性核酸内切酶。 将目的基因与运载体DNA连接， 需要基因的针线——DNA连接酶。 将目的基因运入大肠杆菌， 需要基因的运输工具——运载体。 限制性核酸内切酶 分布：主要在微生物中。 特点：专一性和特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 结果：产生黏性未端（碱基互补配对）。 举例：大肠杆菌的一种限制酶（EcoRⅠ）能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。 限制性核酸内切酶（EcoRⅠ）作用过程 DNA连接酶 连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 DNA连接酶的作用过程 运载体 作用：将外源基因送入受体细胞。 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。 基因操作的基本步骤 如何让大肠杆菌生产人胰岛素？ 基因工程的应用 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 蜘蛛能够吐出蛛丝 例如：关于开始时的一个问题，能否让细菌“吐出”蛛丝？可结合网页介绍。 /ifm/tech/show.asp?n_tec_id=19146 (德科学家称已利用转基因细菌成功制造出优质蛛丝) * 微生物可以有分泌产物，且微生物繁殖速率快 原理： 操作水平： 操作环境： 结 果： 基因重组 DNA分子水平 生物体外 定向地改造生物的性状， 获得人类所需要的品种。 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 点击播放 基因进行了切割以后就有了切口， 怎样才能将有切口的基因与其他基因缝合在一起呢？ 点击播放 C T T A A G A A T T C G 重组DNA分子 （外源基因） ？如何将外源基因送入受体细胞呢？ 注：限制酶与连接酶作用的位点都是 磷酸二酯键 能将外源基因送入细胞的工具就是运载体。 作为运载体必须具备哪些条件？ 1.能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。 2.具多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 3.具有某些标记基因，便于进行筛选。 如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等。 大肠杆菌 DNA 质粒 （环状DNA分子） 控制质粒DNA转移的基因 抗生素抗性基因 利用质粒将外源基因运载入受体细胞中 提取目的基因 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达 归纳： ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 1、基因工程与作物育种：转基因抗虫棉、耐贮存番茄、耐盐碱棉花、抗除草作物、转基因奶牛、超级绵羊等等 2、基因工程与药物研制：干扰素、白细胞介素、溶血栓剂、凝血因子、疫苗 3、基因工程与环境保护：超级细菌 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 转黄瓜抗青枯病基因的甜椒 转鱼抗寒基因的番茄 转基因生物和转基因食品的安全性 当人类拥有了只有大自然才拥有的改造生物、创造生物的能力时，也感到了不安与困惑。人类是否有权按照自已的意愿操纵地球上的生命？人类创造的转基因生物、转基因食品是否会危害整个生物圈，包括人类自身？ 练习： ⒈要使目的基因与对应的载体重组，所需的两种酶是（ ）　 ①限制酶　　　②连接酶　　③解旋酶　　　④还原酶　　　Ａ．①②　　　Ｂ．③④　　Ｃ．①④　　Ｄ．②③ Ａ 2.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 练习 3实施基因工程的第一步的一种方法是把所需的基因从供体细胞内分离出来，这要利用限制性内切酶。一种限制性内切酶能识别ＤＮＡ分子的ＧＡＡＴＴＣ顺序，切点在Ｇ和Ａ之间，这是利用了酶的（　） Ａ．高效性　Ｂ．专一性　　　 Ｃ．多样性　Ｄ．催化活性易受外界影响 Ｂ ⒊基因工程的正确操作步骤是（　）①使目的基因与运载体结合　　②将目的基因导入受体细胞　③检