富勒醇对血管生成的作用机制研究-内科学(消化内科)专业论文.docx

解放军医学院硕士学位论文 解放军医学院硕士学位论文 万方数据 万方数据 目 录 缩略词表 ………………………………………………………………………(1) 中文摘要 ………………………………………………………………………(3) 英文摘要 ………………………………………………………………………(5) 前 言 ………………………………………………………………………(7) 正 文 ………………………………………………………………………(8) 1. 材料与方法 ………………………………………………………………(8) 2. 主要实验步骤 ……………………………………………………………(11) 3. 结果 ……………………………………………………………………(18) 4. 讨论 ………………………………………………………………………(30) 5. 结论 ………………………………………………………………………(33) 6. 参考文献 …………………………………………………………………(34) 文献综述 ……………………………………………………………………(36) 攻读学位期间发表文章情况 …………………………………………………(42) 致谢 …………………………………………………………………………(43) 缩略词表 缩写词 英文名称 中文名称 HAT histone acetyltransferase 组蛋白乙酰基转移酶 HDAC Histone deacetylase 组蛋白去乙酰化酶 HDACi Histone deacetylase inhibitors 组蛋白去乙酰化酶抑制 剂 HIF-1α Hypoxia induced factor 1α 缺氧诱导因子-1α IHC immunohistochemistry 免疫组织化学染色 PAGE Polyacrylamide gel electrophoresis  聚丙醇酰胺凝胶电泳 PBS phosphate buffered PBS 磷酸盐缓冲液 ROS reactive oxygen species 活性氧族 siRNA small interfering RNA 小干扰 RNA VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 RECK  reversion-inducing cysteine rich protein with Kazal motifs Kazal 基序逆向诱导半胱 氨酸丰富蛋白 MMPs matrix metalloproteinases 金属基质蛋白酶 SPF specific pathogen free 无特殊病原体 RPM revolutions per minute 每分钟转速 OD optical density 吸光度 1 EPR enhanced permeability and retention effect  增强的渗透和保留效应 HUVEC human umbilical vein endothelial cell  人脐静脉血管内皮细胞 2 作 者：孙成都 学科专业：内科学（消化内科） 导 师：郭明洲 教授 富勒醇 C60(OH)22 对血管生成的作用机制研究 中文摘要 研究背景：肿瘤血管生成与肿瘤生长、转移密切相关。抗血管生成治疗成为 多种实体肿瘤治疗中的有效方案。富勒醇 C60(OH)22 是一种低细胞毒性纳米材 料，体内研究显示其具有抗肿瘤作用，机制包括免疫调节和抗肿瘤血管生成等， 但它抗血管生成的作用机制尚不明确。既往研究显示 C60 衍生物可以调控 HDAC，而 HDAC 抑制剂通过下调 HIF-1α、VEGF 的表达从而抑制肿瘤血管生 成。本课题进一步研究 C60(OH)22 是否通过调控 HDAC 而影响血管生成。 方法： 通过检测细胞活性（MTT 法）来反映 C60(OH)22 对永生化人脐静脉血 管内皮细胞（HUVEC）增殖的影响。通过细胞侵袭实验（Transwell 法）和网格 形成实验来检测 C60(OH)22 对体外 HUVEC 血管生成的影响。通过检测 C60(OH)22 处理后细胞内活性氧（ROS）以及 HDAC1、HDAC2、HIF-1α、VEGF、RECK 的 表达和 MMP2、MMP9 酶活性的变化，并进一步通过干扰 HDAC1 或 HDAC2 的 表达后检测体外 HUVEC 介导的血管生成、细胞内 ROS 以及 HIF-1α、VEGF、、 RECK 表达和 MMP2、MMP9 酶活性的变化，来研究 C60(OH)22 对血管生成的作 用机制。通过裸鼠的 Matrigel plug 模型，进一步研究 C60(