带阳离子侧臂的卟啉衍生物的合成及其生物活性研究-化学专业论文.docx

摘 要 基因组区域内G-四链体结构的形成可能会对基因功能产生重要的影响，在人 类许多重要的基因组区域都已经发现富含鸟嘌呤碱基G的重复序列具有形成G- 四链体结构的可能性，而明确这些区域能否形成G-四链体及形成何种结构的G- 四链体是研究其生理功能的重要前提。因此开发一种G-四链体探针，用以将G- 四链体结构与单链及双链DNA结构明确区别开来是非常必要的。由于卟啉环与 G-四链体中G-四分体单元尺寸接近，因此卟啉及其衍生物多年来一直是G-四链 体配体研究领域的一个热点。四（N-甲基吡啶-4-基）卟啉（简写TMPyP4）是早 期发现的G-四链体配体，它与G-四链体的相互作用也已被广泛研究。但该配体对 双链DNA却几乎没有选择性。推测其原因，可能是四个甲基吡啶取代基体积偏 小，不能阻止TMPyP4与双链DNA的相互作用。本论文基于上述问题设计合成了 一种新的阳离子卟啉衍生物，并对将其用作G-四链体特异性识别探针的可行性进 行了研究。 本论文在以下几个方面做了具体的研究工作： 1、设计合成了四（1-哌啶乙氧基-苯基）卟啉（简写 TPipEOPP）和四（1- 甲基-1 哌啶乙氧基苯基）卟啉（简写 TMPipEOPP）两种卟啉化合物，并通过 IR、 核磁、质谱等手段确证了它们的结构，研究探索了其合成和分离纯化条件。 2、利用紫外光谱和荧光光谱等光学分析手段，发现TMPipEOPP在与单链、 双链DNA和G-四链体DNA相互作用时，可显示明显不同的光谱性质，能有效地 将G-四链体与单链及双链DNA区别开来，证明了TMPipEOPP是区别G-四链体与 单链及双链DNA的高效光学探针，区分结果甚至裸眼即可判定。也就是说， TMPipEOPP具有比TMPyP4更好的特异性识别G-四链体的能力。 3．通过Scatchard分析和Job plot分析探索了G-四链体与TMPipEOPP之间的结 合模式。发现在低的[G-四链体]/[TMPipEOPP]浓度比下，每个G-四链体分子可以 结合两个TMPipEOPP分子，其中一个TMPipEOPP分子堆积在G-四链体的末端G- 四分体平面上，另一个以外部结合模式作用在G-四链体的沟中。而在高的[G-四 链体 ]/[TMPipEOPP] 浓度比下，结合模式变为两个 G- 四链体分子结合一个 TMPipEOPP分子，即一个TMPipEOPP分子堆积在两个G-四链体之间。 关键词： 阳离子卟啉 G-四链体 DNA 光学探针 ABSTRACT The in vivo formation of G-quadruplex is proposed to be important with in cells. G-rich sequences with a high potential to form G-quadruplexes are found in many important genomic regions. Accurate conformational detection of these gene sequences is a prerequisite for elucidating their biological functions. To achieve this, a probe that specifically recognizes G-quadruplexes in the presence of duplex and single-stranded DNAs must be developed. Because the size of the porphyrin core is close to the G-quartet, porphyrin derivatives are important candidates in G-quadruplex ligand studies. Previously discovered 5,10,15,20-Tetrakis(N-methylpyridinium-4-yl)- 21H,23H-porphyrin (TMPyP4) is a well-known G-quadruplex ligand, and the binding interaction between TMPyP4 and G-quadruplexes has been extensively studied. However, TMPyP4 has almost no selectivity for G-quadruplex against duplex DNA. One reason might be that the four side arm methylpyridine