低矿物质水对高脂血症及精氨酸酶影响的实验研究-劳动卫生与环境卫生学专业论文.docx

第三军医大学硕士学位论文 第三军医大学硕士学位论文 PAGE PAGE 12 低矿物质水对高脂血症及精氨酸酶影响的实验研究 摘 要 从上世纪九十年代初期，由于环境污染日趋严重，水源水质变差。自来水质量下 滑、二次污染加剧、人们生活水平的提高及自我保健意识的增强等因素，引起人们对 饮水质量的高度重视，使人们对洁净水的要求越来越高。由此经深度加工如：反渗透、 纳滤、超滤、吸附、交换、氧化等处理的新型软饮水不断涌现。它们在除去污染物的 同时，也将有益的矿物质元素去掉，因此它们含有极少或不含矿物质元素。 据调查目前西方发达国家 90%家庭生活用水(包括烹饪、洗涤等)都是软水。我国 的新型饮用水企业，有 90%左右的都是生产低矿物质软水。此外，全球大约有 1/5 的 家庭以瓶装水作为主要饮水，而这些瓶装水约有一半是低矿物质软水。可见低矿物质 软水在现代生活中的地位会越来越重要。 多年来大量流行病学调查研究发现饮水的硬度特性与心血管疾病 (心脏病、动脉 粥样硬化、高血压和中风) 以及其它几种疾病之间呈负相关。还有研究证明饮水中某 些矿物质元素能与其它元素或蛋白质争夺结合位点，影响细胞膜的渗透性或者通过其 它代谢作为酶反应的活化剂或抑制剂，在若干生物过程中发挥重要作用，从而对人体 健康造成影响。也有相关研究报道认为饮用低矿物质软水对健康无不利影响。他们认 为人体矿物质仅有 10~20%来源于饮水，绝大部分可以从食物补充。饮水的意义仅在 于补充水分。 由于饮水硬度与健康的关系涉及因素复杂，且研究过程中存在地域、性别、种族、 水质、实验方法及现场研究上的差异, 出现不少结论上的偏差。因此，饮用低矿物质 软水对健康有无负面影响，至今仍无定论。 本研究团队自 1998 年起关注长期饮用软水对健康的影响。前期一系列动物实验结 果显示长期饮用低矿物质软水能使血脂代谢关键指标(TC、TG、LDL-C)及载脂蛋白 B(apoB)浓度升高、脂蛋白关键酶(LCAT、LPL、HL)活性降低；同时肝脏 apoB mRNA 表达水平出现升高趋势,apoAⅠmRNA、LDLR mRNA 表达水平出现下降趋势。此外， 我们还观察到血清丙二醛(MDA)、内皮素(ET-1)含量升高等与氧化应激失衡的改变。 在另一项动物实验研究中发现大鼠饮用低矿物质水 28 周后，可引起血清 NO、尿素、 肌苷、蛋白氮含量降低，MDA 含量显著升高，并且在蛋白质谱筛查中发现大鼠肝脏 中精氨酸酶表达显著降低。 精氨酸酶(Arginase)是机体鸟氨酸循环中的一种分解酶，以精氨酸为底物将其分解 成尿素和鸟氨酸，鸟氨酸进一步代谢产生多胺、脯氨酸等，刺激血管平滑肌细胞增殖 和胶原沉积导致血管内皮损伤。根据实验和文献报道我们推测精氨酸酶及其相关蛋白 可能在软水和心血管损伤之间起着分子桥梁作用。并且迄今为止国内外文献未见有关 低矿物质软水与心血管疾病之间分子事件的解读研究。 鉴于前期动物实验发现长期饮用低矿物质水可诱导血脂指标异常，因此我们选择 对高脂代谢敏感的新西兰兔为观察对象，以低矿物质水作为软水的代表，模拟现代高 脂饮食，全面探讨高脂食物与低矿物质软水联合对心血管产生影响的分子机制，着重 观察①血脂代谢关键指标(TC、TG、LDL-C、HDL-C、apo-A、apo-B)和氧化应激指标 (MDA、SOD、NO)改变为重点的研究；②精氨酸酶和 NOS 在饮用低矿物质软水影响 心血管中的效应研究。这对于客观评估长期饮用低矿物质软水与健康的关系，筛选今 后可用于人群健康保护的关键分子具有重要意义。 实验方法： 1、动脉粥样硬化动物模型的建立和不同水质和饲料对兔动脉粥样硬化形成作用的 研究。 3 月龄健康雄性新西兰兔 28 只，体重(2.4±0.3) kg，室温 22℃±2℃、湿度 75%±5% 条件下适应性饲喂 2 周后按随机数字表法分为 4 组，每组 7 只，分别为： 第Ⅰ组：自来水+普通饲料； 第Ⅱ组：低矿物质水+普通饲料； 第Ⅲ组：自来水+高脂饲料； 第Ⅳ组：低矿物质水+高脂饲料； 自由饮水，饲养 26 周。 普通饲料按中华人民共和国国家标准“实验动物全价营养饲料”(GB14924-94)要求 配制；高脂饲料配方根据国内外文献报道的经典配方配制。 自来水水质符合我国国家生活饮用水卫生标准(GB5749-2006)；低矿物质水水质 (纯净水)符合我国饮用瓶装纯净水国家标准(GB17324-2003)。 实验期间，①观察不同水质和饲料联合对新西兰兔饮食量、饮水量、精神、体重、 毛发、排泄物等一般情况的影响。②每月抽取耳缘静脉血 4ml 检测各项血脂指标(TC、 TG、LDL-C、HDL-C、apo-A、apo-B)及氧化应激指标(MDA、SOD、NO)情况； 实验结束时，放血处死全部实验动物