中国人肥基因大杆菌中的表达.pptVIP

肥胖基因概述及发现 肥胖基因(Obese gene) 是近几年克隆的一个新基因 , 该基因产物 ———瘦蛋白 (leptin)，是由脂肪组织产生并分泌167个氨基酸组成的多肽 ,分泌蛋白分子量约16 kb, 是反映体内脂肪组成及体内脂肪含 量和调节体重的重要信号因子 1783年Lavoisier和Laplace研究表明能量平衡受生理调节。1950年发现了第一个隐性基因突变，命名为肥胖基因(Obese gene），它是一个单基因突变，导致重度肥胖和2型糖尿病，但其研究一直进展甚微。动物试验表明将肥胖鼠和正常鼠血液循环相连，肥胖鼠体重有所下降，提示正常鼠体内有一种因子可控制过度肥胖，而肥胖鼠则因基因突变而使该因子表达减少或作用丧失。经过8年努力，Friedman实验组运用定位克隆(Positional cloning)技术，分离得到小鼠的肥胖基因并得到人的同源序列，为揭开肥胖症之迷及肥胖症的诊治奠定了基础。瘦素作用于下丘脑，控制代谢、能耗和生殖系统，调节体内脂肪含量。实验表明，重组的瘦素具有使肥胖小鼠代谢和体重正常化，恢复肥胖基因缺陷小鼠生育能力等活性，而无明显的副作用〔4，5〕。 脂肪组织：取自男性中国人胃切除手术病人的正常大网膜，液氮冻存备用 新鲜脂肪组织立即置于液氮冻存。取1克冻存的大网膜脂肪组织，剪成数小块，在总量为10ml的Trizol液中高速匀浆1分钟。将组织