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斑马鱼高分辨率整胚原位杂交方法与流程
HEREDITAS (Beijing) 2013 4 , 35(4): 522―528
ISSN 0253-9772 实验指南
DOI: 10.3724/SP.J.1005.2013.00522
斑马鱼高分辨率整胚原位杂交实验方法与流程
张春霞, 刘峰
, , 100101
整胚原位杂交技术是利用反义RNA 探针检测体内mRNA 表达的一项技术, 在利用模式动物研究基因时
空表达方面有着重要的应用。如何使用该技术得到特异、高敏感度的表达结果, 对每一个使用该技术的实验室
来说都很重要。本实验室参照常规的实验方法, 对该技术加以改进, 使之更加灵敏, 结果更加特异。文章主要
以斑马鱼为例, 介绍了整胚原位杂交技术的发展历史, 并重点介绍了本实验室所用的整胚原位杂交实验流程,
同时还分析了实验结果不理想的原因及其解决方法。
斑马鱼; 整胚原位杂交
A brief protocol for high-resolution whole mount in situ hybridiza-
tion in zebrafish
ZHANG Chun-Xia, LIU Feng
State Key Laboratory of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Institute of Zoology , Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101,
China
Abstract: Whole mount in situ hybridization (WISH) is a popular technique that is used to study temporal-spatial gene
expression at mRNA level in model systems. Sensitive and high-resolution WISH is important for every laboratory that uses
this technique to study expression pattern of genes in wildtype and perturbed embryos. Based on the commonly used proto-
cols in fish community, our lab optimizes them to get more sensitive and specific results. Here, we briefly summarize the
history of this technology using zebrafish as an example, describe a detailed experimental protocol, and provide trouble-
shooting for imperfect results and their solution.
Keywords: zebrafish; whole mount in situ hybridization
RNA mRNA , ,
mRNA ,
1 ,
, ,
, RNA
收稿日期: 2012−11−14; 修回日期: 2012−12−27
作者简介: , , Tel: 01
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