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人,动物和环境耶氏菌的种群遗传学 16 研蕊甜碍蒸’芬 地方病译丛1994年l5嚣第6新 f一吖人,动物和环境耶氏菌的种群遗传学 M.Dol~s菩 Sehnder等氏首先将多位点薅电泳 (M既)应用于原板生橱.用茁拄末可翟誊;各 千基因位点曲基田不同篓定菌株进行分类和 流行病学研究.用MEE菌株寝理出大量 谢鬻的丰邕苏番动性特征,逡璺酶通过染色基 因反应确定.每种酶的皂攮圈在相应结构基 因位点代表不同基因.包括在率研究的不同 酶(基因)如果量足够,那么,每次电辣都具有 电球瑶的腰茧特征.此圈型称为电球受 (ET),它可能与瓤茸基因型一致.所以, MEE可用于瘟行病学研究和种群基因研究. 本文研究的耳曲是稠量耶氏蒴扁不同种 大量菌株之辩姻基周亲鬈水平并分辑不同来 擅f酊同种菌蛛之问的基l因差异.另外,率研究 还查明分青白人,动暂和环境的菌株之阀的 流行病学美景是否髓得到证实. 材辩和方法 分离首糠我们分析了来自环境~79 袜).动朝{26株)和人(133株)J~238抹耶氏 赫.研究中还包括6株参照栋. 1所有昂巍藉株l:=I及l1份动物抹和108份 人体株均分离冉璃士.其它23份人体分离株 获鱼毙利时丹麦,法国,希鞲,挪威和西班 牙.一批来自动物的l5株分离白比划时.在人 体分离抹巾,l2O株获鱼最便.5椿获自血菠.z 株获白痰,l株获目琳巴耋吉.l株获白皮下结 节.2株出处尚未弄清. 经过生化鉴定.2I’株琊艮茵日娄为下面 几种:小硒结肠炎菌(z6el1),Yer~niainter- m出(3B撩),Ye~iniafrede~ksenil(13椿), M ,f帆’31{ 假结棱苗(9株),Yezi~iakristensenii(7株). ~~siniab哪vied(6椿).Yearsinjaeldovae 【l棘),Yv..r~nlamm进(1椿)和Yerni8 rucke_ri(1椿). 表型特征用W’am.~8等氏伪试验步 骥进行生亿试验.用卵磷脂试验代替丑}{酶试 验.捌定啦礤髋胺酶活牲可将致病与非致病 菌鉴别开.将菌连羁法日巴黎巴斯蕾镯}究所 世界卫生组织耶尔森凭菌中心进行血港分型 和班苗体分塑.用小脑结肠炎菌及其相关种 类的5o种0抗血清进行血清分型j按Nie,a!一 let等氏描述曲方法确定噬茁型. 基甚分析太体按land等氏摘述 的方法进行MEE,发现以下l8种酶的位点, 琼背撤酶,过氧化氢酶,延和索馥酶,葡糖一6 一 磷酸脱氢酶,谷氩酸我氢酶,甘滟醛璞致脱 氢爵,各氪孳虢酸轻移酶,非口萄哚氧化酶,异 柠檬限脱氢酶,亮氮磺氮基败酶,苹果陵脱氢 酶.甘露辞一卜一磷照盟氮酶,尊露籁罅酝并 构孺,薇苷磷酸酶,L一苯;麓一三,党氦 酸歇跨,ph唧hoglnoo?1lta?,6一磷陵蔼萜 脱氢酶,礴竣葡蓊异构酶. 做了以_F改动,蔼暂一6一骑酸脱氧酶地 电泳在援冲疲D中进行.延耐索醴酶的电泳 在援冲菠F中进行. 用Harris和H印kinIon二氏鹩方法对 过氧化氧爵穆谷氮草酰乙强转移酶进行特殊 染色. 托计分析资辩的统甘分析按照T.s. whittam和R.K.SeIander氏设计的计葬机 程序遗行.每种酶位直的遗传差异(h)按下 地方病谇丛1994年15卷第6期17 面公式计算:h=(1一?)(i)[n/(n一1))xi为 ith基因频率,n为ETs数.平均遗传差异 (H)为18种爵位点的全都h值的算术平均 值.每对ETs间的遗传距离按照出现的不同 的基因位点比例表示(失配).通过平均连结 法从基因距离的矩阵系数形成ETs群. 结果 爵位点和基因,18种酶位点都是多形态. 每个位点的基因数在4(核苷磷酸化酶)至9 (备氨草酰乙酸转移酶和磷酸葡糖异构酶)之 问,每个位点的基因平均数是6.72. ETs在所研究的244株菌中.我们确定 了137个ETs,平均遗传差异是0.531.在168 株小肠结肠炎菌中证实有68个ET8.在73株 Y.intermedia,Y.frederiksenil,Y.kris— tensenii.Y.hercovleri和假结核菌,我们分别 证实有34,13,7,6和6个ETs.3个参照株Y. aldovae,Y.mollarefil和Y.”ckeri都有一个 ET. 168株小肠结肠炎菌的平均遗传差异是 0.372.小肠结脑炎菌6SETs中主要有2个 群,这2种群是通过0.57遗传距离来测定的, A群由ETsl5到ETs38组成,B群由ETs39 到82组成.A群包括117株菌,属于生物型2, 3,4.它