6核酸类药物及其生产工艺-药制论坛.pptVIP

核酸类药物生产方法主要有提取法和发酵法。 提取法生产DNA和RNA的主要技术是，先提取核酸和蛋白质复合物，再解离核酸与蛋白质，然后分离RNA与DNA。 发酵法主要用于生产单核苷酸。 一、核酸类药物的分离纯化一般方法 1、RNA与DNA的提取与制备 2、核苷酸的制备 3、核苷的制备 二、核酸类物质的分离提取及其发酵生产 1发酵法制备RNA 2酶法制备脱氧核苷酸 酶法制备5’单核苷酸 双酶法生产肌苷酸和鸟苷酸 产氨短杆菌嘌呤核苷酸生物合成调节机制 5受GMP ATP的反馈抑制 1被G阻遏 2受GMP反馈抑制 3被A阻遏 4受ATP ADP AMP GMP反馈抑制 6受GTP的反馈抑制 注：PRPP——5－磷酸核糖焦磷酸 产氨短杆菌腺嘌呤缺陷 型菌株IMP发酵机制 肌苷酸诱变图谱 肌苷酸产生诱变过程的产量变化 1、选用产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株以解除腺嘌呤衍生物对的反馈抑制； 2、提供亚适量A培养基通过补救途径合成微生物生命活动所需要的DNA，不足以产生反馈抑制的腺嘌呤衍生物； 3、培养基中加入特异抑制IMP脱氢酶的化学物质（如8－氮杂鸟嘌呤）则IMP被切断，GMP不能生成，解除GMP的反馈抑制，使IMP进一步被积累； 提高IMP产量的因素 4、Mn2+在限量的情况下培养后期产氨短杆菌细胞膜容易透过细胞膜，并且嘌呤核苷酸补救合成所需的酶和中间体核糖－5－磷酸很容易透过，在细