第19章节 生物素-亲合素系统跟其在免疫检测技术中的运用新.pptxVIP

临床免疫学检验技术; 肖建华;; ;概 述; ;;一、生物素理化性质 ; ;生物素侧链末端羧基经化学修饰后制成带各种活性基团的衍生物—活化生物素。;活化生物素易与抗原、抗体、酶及核酸分子中相应基团偶联形成生物素化标记物。 ;C;BNHS分子可与蛋白质赖氨酸的氨基形成肽键。 BNHS适用标记抗体和中性或偏碱性的蛋白质。;如何减小空间位阻;;2. 标记蛋白质醛基的活化生物素;3. 标记蛋白质巯基的活化生物素 马来酰亚胺-丙酰-生物胞素（MPB) ：能特异地与蛋白质巯基结合的活化生物素。 4. 标记核酸的活化生物素 (1)光敏生物素(photobiotin)： 侧链上连接的芳香基叠氮物基团，经光照后变为芳香基硝基苯，与腺嘌呤N-7位氨基结合，形成生物素化的核酸探针，用于DNA或RNA的标记。;(2)生物素脱氧核苷三磷酸（Bio-dUTP）：作为TTP的结构类似物，可采用缺口移位法通过DNaseⅠ和DNA聚合酶Ⅰ的作用而掺入到双链DNA中。 (3) BNHS和BHZ：与核酸胞嘧啶分子中的N-4位氨基结合，形成生物素标记的核酸探针，但对碱基配对有影响。（不常用）;活化生物素通过侧链与蛋白分子连接； 一个蛋白分子可被多个生物素标记-多价； 可标记生物活性大分子，如抗原、抗体。BNHS多标记抗体，BHZ则多标记偏酸性抗原，标记后抗原、抗体活性不变； 可对示踪物标记，碱性磷酸酶标记后