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专业学习 参考资料
实验一:观察DNA、RNA在细胞中的分布(必修一P26)
一.实验目的:初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
二.实验原理
1. 甲基绿+DNA 绿色
两种试剂不是单独使用,应混合使用
吡罗红+RNA 红色
几种液体的作用2. 8%盐酸:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中的DNA和蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
几种液体
的作用
0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮细胞正常形态
蒸馏水:配制染色剂,冲冼载玻片
三.方法步骤
操作步骤
注意问题
解释
取口腔上皮细胞制片
载玻片要洁净,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液(生理盐水)
用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻刮几下取细胞
将载玻片在酒精灯下烘干
防止污迹干扰观察效果
保持细胞原有形态
消毒为防止感染,漱口避免取材失败
杀死并固定装片;烘干时应来回移动,防止受热不均破裂
水解
将烘干的载玻片放入质量分数为8%的盐酸(HCl)溶液中,用300C水浴保温5min
= 1 \* GB3 ①改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞
= 2 \* GB3 ②促进染色体的DNA与蛋白质分离而被染色,细胞为死细胞
冲冼涂片
用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S
洗去残留在外的盐酸
缓水流:防止细胞被冲走
染色
用吸水线除去多余的水分
滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min
吸取染色剂
除去多余的染色剂并盖上盖玻片
观察
先低倍镜观察:选择染色均匀、色泽浅的区域,移至视野中央,调节清晰
后才换用高倍物镜观察:
使观察效果最佳
现象
细胞核大部分被染成绿色
细胞质大部分被染成红色
细胞核也有小部分被染成红色
细胞质也有小部分被染成绿色
结论
DNA主要集中分布于细胞核中
RNA主要集中分布于细胞质中
在细胞质中也有DNA分布
在细胞核中也有RNA分布
实验二: 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(必修一P18)
一.实验目的:尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
水浴加热二.实验原理:某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物,产生特定的颜色反应。
水浴加热
1.还原糖(如葡萄糖、果糖、麦芽糖)+ 斐林试剂 砖红色沉淀。
使用时:甲乙液等量混匀后立即使用斐林试剂 甲液:0.1g/ml NaOH 溶液
使用时:甲乙液等量混匀后立即使用
斐林试剂
乙液:0.05g/ml CuSO4 溶液
实质:是还原糖(全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖)与新制的Cu ( OH ) 2反应生成砖红色氧化亚铜(Cu 2O)。
2.脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
3.蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。(蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用,产生紫色反应。)
使用时:先加A液后加B液双缩脲试剂 A液:0.1g/ml NaOH 溶液
使用时:先加A液后加B液
双缩脲试剂
B液:0.01g/ml CuSO4 溶液
实质:在碱性条件下,肽键结构与铜离子反生络合反应,生成紫色络合物。
4. 淀粉遇碘变蓝色。
三.实验材料
1.做还原糖鉴定实验:应选含糖高,颜色为白色或近白色的植物组织,如苹果、梨。(因为组织的颜色较浅,最好无色,防止颜色干扰且易于观察。)
2.做脂肪的鉴定实验:应选富含脂肪的种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3~4小时(也可用蓖麻种子)。
3.做蛋白质的鉴定实验:可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。
四、实验试剂
斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、体积分数为50%的酒精溶液,碘液、蒸馏水。
五、方法步骤
(一)可还原糖的鉴定
操 作 方 法
注 意 问 题
解 释
1. 制备组织样液。
(去皮、切块、研磨、过滤)
苹果或梨组织液必须临时制备。
要取组织的颜色较浅,最好无色,易于观察。
因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖。
2. 取1支试管,向试管内注入2mL组织样液。
3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂,振荡(此时呈现斐林试剂的颜色:浅蓝色)。
应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存,使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;
切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。
斐林试剂很不稳定,易分解。
甲、乙液分
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