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一株固氮芽孢杆菌的分离与鉴定.PDF
中国农学通报 2015,31(26):60-65
Chinese Agricultural Science Bulletin
一株固氮芽孢杆菌的分离与鉴定
1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2
刘莹莹 ，王继雯 ，岳丹丹 ，巩 涛 ，刘 莉 ，李冠杰 ，
1,2 1,2 1,2 2 1,2
甄 静 ，赵俊杰 ，杨文玲 ，慕 琦 ，陈国参
1 2
（河南省微生物工程重点实验室，郑州450008 ；河南科学院生物研究所有限责任公司，郑州450008 ）
摘 要：为从土壤中分离得到高固氮效能的芽孢杆菌，为固氮微生物肥料的开发提供优良的菌株，从小
麦的根际土壤中分离得到能在无氮培养基上生长的芽孢杆菌株，然后采用Touch-Up PCR（上升PCR ）的
方法从菌株中扩增固氮酶的nifH 结构基因和用全氮比色法测定固氮效能的方法，复筛出具有nifH 结构
基因同时具有高固氮酶活的菌株，进一步从形态、生理生化、16S rDNA 序列分析等方面对其进行鉴定。
结果表明从小麦的根际土壤中初筛得到能在无氮培养基上生长的5 株芽孢杆菌，然后复筛得到1株抗逆
性强、具有nifH 结构基因同时具有高固氮效能的菌株C ，经鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium) 。
2
关键词：固氮；芽孢杆菌；nifH 结构基因；16S rDNA
中图分类号：Q939.96 文献标志码：A 论文编号：cas
IsolationandIdentificationofaNitrogen-fixingBacillusStrain
1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2
LiuYingying ,WangJiwen ,YueDandan ,GongTao ,LiuLi ,LiGuanjie ,
1,2 1,2 1,2 2 1,2
ZhenJing ,ZhaoJunjie ,YangWenling ,MuQi,ChenGuocan
1
(KeyLaboratoryofMicrobialEngineeringofHenanProvince,Zhengzhou450008;
2LimitedLiabilityCompanyofInstituteofBiology,HenanAcademyofScience,Zhengzhou450008)
Abstract:ThepurposeofthisstudywastoobtainastrainofBacilluswithhighnitrogenfixingactivityisolated
fromsoilandprovideexcellentstrainforthedevelopmentofnitrogenfixingmicroorganismf
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