丹参注射液体外对原代人软骨细胞的生物效应试验研究-药物分析杂志.PDF

药物分析杂志 Chin J Pharm Anal 2018,38(2) ·275· 丹参注射液体外对原代人软骨细胞的生物效应实验研究* 1 2 2** 2** 朱志灵 ， 2 4 3∗∗ 邵安良 孙雪莲 林羽 杨昭鹏 徐丽明 ， ， ， ， ， （1. 福建中医药大学药学院，福州350122 ；2. 中国食品药品检定研究院，北京102629； 3. 福建中医药大学，福州350122 ；4. 关节动力安达（天津）生物科技有限公司，天津300308 ） 摘要　目的：通过对丹参注射液对体外培养的原代人软骨细胞的生物效应分析，探讨其治疗骨关节炎的作 用机理。方法：以丹参注射液丹参生药（1.5 mg ·mL-1 ）作为计算药物浓度。药物分组：对照组、0.5、1.0、2.0、 4.0、8.0、16.0 mg ·mL-1。用MTT 法评价原代人关节软骨细胞（第3 代）增殖活性；用定量PCR 法测定细胞Ⅰ、 Ⅱ型胶原的表达量，评价软骨细胞的分化；用酶联免疫方法检测细胞Ⅰ、Ⅱ型胶原的含量；用糖胺多糖试剂盒 法检测细胞总糖胺多糖的含量，评价软骨细胞的功能蛋白水平。结果：MTT 实验结果显示，各浓度丹参注射 液组的细胞相对活性均低于对照组，且降低趋势有量-效关系，提示丹参注射液对原代人关节软骨细胞有生 长抑制效应。定量PCR 结果显示，各浓度组细胞Ⅰ型胶原mRNA 表达量均低于对照组，且有一定的量-效 关系。Ⅰ型胶原蛋白检测结果显示，低剂量（≤2.0 mg ·mL-1 ）组可显著抑制Ⅰ型胶原表达。结果提示低剂量 的丹参注射液可能对原代人关节软骨细胞的脱分化有一定的抑制作用。同时，低剂量丹参注射液（≤4.0 mg -1 ·mL ）能促进糖胺多糖的含量增加，提示低剂量丹参注射液有促进软骨形成的生物效应。结论：低剂量的 丹参注射液可轻微抑制人第3 代关节软骨细胞的增殖，抑制Ⅰ型胶原（脱分化指标）的形成和促进糖胺多 糖的合成，提示其具有促进软骨形成的生物效应。 关键词：丹参注射液；骨性关节炎；治疗机理；原代人软骨细胞；增殖活性；糖胺多糖试剂盒；定量PCR 法 中图分类号：R 917　　　文献标识码：A　　　文章编号：0254-1793 （2018 ）02-0275-07 doi ：10.16155/j.0254-1793.2018.02.12 Biological effect in vitro study of salvia miltiorrhiza injection * on the primary human chondrocytes 1，2 2 4 3** ZHU Zhi-ling ，SHAO An-liang ，SUN Xue-lian ，LIN Yu ， YANG Zhao-peng2** ，XU Li-ming2** （1．School of Pharmacy ，Fujian University of Traditional Chinese Medicine ，Fuzhou 350122 ，China ；2．National Institutes for Food and Drug Control ，Beijing 102629 ，China ；3．Fujian University of Traditional Chinese Medicine ，Fuzho