壳聚糖纳米基因载体的制备和鉴定-南方医科大学学报.PDF

$##_$Z![7777777777777777777777777777777777777777777777777777777777777 南方医科大学学报ZB70KGO7VFP7?4DQ[ + !2! + 壳聚糖纳米基因载体的制备和鉴定 苏 丹!季爱民南方医科大学珠江医院新药研发中心!广东广州 !#$%$ # 摘要 目的制备载基因壳聚糖纳米粒 研究纳米粒的结构特征以及对细胞的基因转染效率 方法 用表达绿色荧光蛋白 ! ! # $ ! % 的质粒 ’() 作报告基因 采用复凝聚法制备壳聚糖*’() 纳米粒 琼脂糖凝胶电泳分析壳聚糖和+,-. 的结合能 ! ! 力 通过比色法检测其包封率 用纳米粒度仪和原子力显微镜对纳米粒的形态和粒径分布进行考察 通过荧光显微镜观 察壳聚糖纳米粒介导 在体外培养的人结肠腺癌细胞 中的表达 结果 琼脂糖凝胶电泳分析结果表明 ’() /010 % ! ! % +,- 与壳聚糖之间通过静电作用而完全结合 包封率大于2#.3 制备的壳聚糖*’() 纳米粒为结构紧密的不规则球 ! ! % ! 形 平均粒径为$#2.45 多分散指数为#6!7 体外细胞转染的结果表明 壳聚糖*’() 纳米粒能介导’() 转染/010 细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白 结论 壳聚糖可以有效凝聚 采用复凝聚法可制得 范围荷正电 % +,- ! ##8!##.45. ! % ! % ! 的纳米粒 有较高的包封率 壳聚糖纳米粒在体外能将基因递送到细胞内 并且报告基因能在细胞内表达 因此 壳聚糖 作为非病毒基因载体具有介导核酸类生物大分子的应用价值% 关键词 壳聚糖 纳米粒 基因载体 转染 ! 中图分类号! 文献标识码! 文章编号! # $ 92: - ;=*:$!: $## #!*#!2!*#: !#$%’(’ )*+ ,-).),$/.(0)$(1* 12 ,-($1’)**345 *6*176.$(89’ )’ :* ,)..(.’ ?7+@4A7