鸡柔嫩艾美耳球虫地分离与鉴定研究的.doc

鸡柔嫩艾美耳球虫的分离与鉴定研究 作者 曹元元，郭维维，龚加路，刘林帅，杨乐乐，张乐乐 指导教师 葛凯 摘要：取具有球虫病典型症状的病鸡，刮取其盲肠内容物，用离心沉浮法收集鸡球虫卵囊，加入适量的2.5%重铬酸钾溶液，置于29℃±1℃的恒温培养箱中培养，定时观察卵囊的发育情况，并测量卵囊的大小，结合病鸡的临床症状和病理变化，计算卵形大小等形态指标，经差异显著性检验(F检验)，结果差异不显著，而且观察病鸡病理变化，初步鉴定分离到的鸡球虫为柔嫩艾美耳球虫。 关键词：鸡，柔嫩艾美耳球虫，分离，鉴定 The Isolation and Identification of Eimeria tenella in Chicken Abstract: Take a typical symptom of coccidiosis in chickens, scraping the cecal contents, were collected by centrifugation ups and downs of chicken coccidia oocysts, adding an appropriate amount of 2.5% potassium dichromate solution, placed in 29 ℃ ± 1 ℃ in the Constant temperature incubator, regular observation of the development of oocysts, and to measure the size of oocysts, with chickens in the clinical symptoms and pathological changes in laboratory measurements obtained from chickens infected with oocysts body size, egg size calculation form Indicators, the significant difference test (F test), the result was not significant, and the observed pathological changes in chickens, isolated from the chicken identified as Eimeria tenella. Key words: chicken, Eimeria tenella, isolation, identification 鸡球虫分布范围广，危害大，严重威胁养禽业的发展，每年给全世界养禽业造成超过20亿英镑的直接经济损失[1]，我国在这方面虽无准确的统计，但由于鸡只饲养规模大、数量多，加之管理粗放，鸡球虫病造成的经济损失相当惊人[2]，因此，许多学者致力于球虫病的研究。集约化养鸡场是球虫病暴发的最适宜场所，其发病率可高达80%以上[3]。鸡球虫病的病原为原虫中的艾美耳科艾美耳属的球虫。鸡球虫病(Coccidiosis)是由多种艾美耳球虫寄生于鸡的肠上皮细胞引起的一种原虫病。本病分布广泛,感染普遍,是鸡群中最常见的,也是危害最严重的寄生虫传染病世界各国已经记载的鸡球虫种类共有13种之多，7种鸡球虫，不同种的球虫，在鸡肠道内寄生部位不一样，其致病力也不相同。(Eimeria tenella)，寄生于盲肠，(E.necatrix)。在自然发病情况下，多系混合感染，而以某一种占优势。为了研究的方便及研究结果的准确性，往往应用纯种[5]。应用单卵囊分离技术[7]，可进行鉴别球虫的种类和建立球虫的纯种体系。尽管目前分子生物学技术等一些高科技手段已用于鸡球虫种类鉴定方面的研究，但传统的形态学鉴定方法仍然是不可缺少，并且是可靠的。皖西地区的养鸡业趋于集约化和规模化，鸡球虫病的仍普遍发生。为此我们对皖西地区鸡球虫的种类进行初步鉴定，对进一步研究球虫的致病性，药物效应和机体对球虫的免疫性等均有重要的意义。 1 材料与方法 1.1 实验材料 六安市附近某养鸡场提供一只典型球虫病鸡。 1.2 试剂和仪器 2.5%重铬酸钾溶液、饱和食盐水溶液、生理盐水、吸管、40目铜丝筛、260目尼龙筛、研钵、平皿、双目生物显微镜（型号:XS-200,江南光电集团 1.3 卵囊的分离与培养 取病鸡盲肠，刮取其内容物和黏膜，研碎后加生理盐水搅匀，经40目铜丝筛和260目尼龙筛过滤，滤液2000r/min，离心10min，收集沉淀。沉淀置2.5%重铬酸钾溶液中，在29℃恒温培养箱内培养成熟，然后将成熟的卵囊液置4℃冰箱中保存备用。 1.4 球虫卵囊的接种 1.4.1 显微镜镜检球虫卵